*殘留檢驗(yàn)的液相色譜測定方法

（1）試劑和材料 除另有規(guī)定外，試劑均為分析純；水為蒸餾水
①乙腈
②二氯甲烷
③正己烷
④甲醇
⑤*：經(jīng)650~C灼燒4h后，貯于密閉容器中備用
⑥乙腈水溶液：乙腈—水（80+20）。
⑦*柱：6cm~1．8cra（內(nèi)徑），內(nèi)裝5cm高的*。
⑧*標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥99％。
⑨*標(biāo)準(zhǔn)貯備液：稱取lo．0mg*，用乙腈水溶液溶解并稀釋定容至50ml棕色容量瓶中，保存于冰箱中。該液lml相當(dāng)于200~g*。
⑩*標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取*標(biāo)準(zhǔn)貯備液o．5ml，用水稀釋定容至100ml棕色容量瓶中。該液lml相當(dāng)于1.0ug*，保存于冰箱中。
（2）儀器和設(shè)備
①液相色譜儀：配有紫外檢測器
②旋渦混勻器或超聲波提取儀。
③離心機(jī)。
④多功能微量化學(xué)樣品處理儀。
⑤蒸發(fā)燒瓶：lOOml。
⑥錐形瓶：100ml，具塞。
⑦離心管：5ml，具塞帶刻度。
⑧微量進(jìn)樣器，25uL。
（3）測定步驟
①提取 稱取試樣約log（至0．01g），于lOOml錐形瓶中，加25ml二氯甲烷．在旋渦混勻器或超聲波提取器上提取5min，提取液通過*柱濾人lOOml蒸發(fā)燒瓶中，繼用25ml二氯甲烷重復(fù)提取2次，均通過*柱濾人同一蒸發(fā)燒瓶中，用二氯甲烷淋洗*柱，濾液經(jīng)多功能微量化學(xué)樣品處理儀（50℃）濃縮至干。
②凈化 準(zhǔn)確加入1．0ml乙腈水溶液溶解殘?jiān)瑫r(shí)加入lml正己烷混勻2min。溶液移人10ml離心管中，3000r／Illin離心2rain后，用尖嘴吸管移去上層正己烷層，再向離心管中加入lml正己烷，棍勻2min，離心，用吸管移去上層正己烷層，將下層清液用乙腈水溶液定容至1．Oral，供液相色譜測定。
③測定
a.液相色譜條件
色譜柱：ODS-C18柱，250mm~4．Omm（i．d．），粒度lOum
流動(dòng)相：乙腈—水（40+60），500mi溶液中加0.5mi磷酸（85%）
流速：1．0ml／min
檢測波長：365nm
柱溫：室溫
進(jìn)樣量：20uL
b．色譜測定 根據(jù)樣液中*殘留量情況，選定峰面積相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液中*響應(yīng)值均在儀器檢測線性范圍內(nèi)。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積參插進(jìn)樣進(jìn)行測定。在上述色譜條件下，*保留時(shí)間約為6．0min。
④空白試驗(yàn) 除不加試樣外，均按上述測定步驟進(jìn)行。
（4）靈敏度和回收率
本方法的測定低限為0．01mg／kg
在0．0l～3．00mg／kg添加濃度水平上，回收率范圍為87.7％～98.3％。