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        懸浮細(xì)胞的分離方法

        時間:2016/1/8閱讀:349
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            從人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)取出的標(biāo)本組織是結(jié)合緊密的多種細(xì)胞,不利于各個細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖;若需獲取大量細(xì)胞,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細(xì)胞解離成單個細(xì)胞。若血液、羊水、胸腔積液或腹水等標(biāo)本離心分離方法獲取。

        (一)材料

        1.標(biāo)本血液、羊水、胸腔積液或腹水等懸液材料。

        2.試劑PBS、培養(yǎng)液。

        3.器具吸管、離心管、培養(yǎng)瓶。

        (二)實驗方法

        1.標(biāo)本材料若是來自血液、羊水、胸腔積液或腹水的懸液材料,zui簡單的方法是采用1000r/min低速離心10min。值得注意的是離心的速度過大,離心時間過長會擠壓細(xì)胞造成細(xì)胞的損傷甚至死亡。

        2·離心的沉淀先用無鈣、鎂PBS洗兩次,再用培養(yǎng)液洗一次后,調(diào)整適當(dāng)細(xì)胞濃度后分瓶培養(yǎng)。

        3.若選用懸液中某些細(xì)胞,經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層.這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞

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