2015 08-03

網(wǎng)狀纖維染色－Wider染色法

網(wǎng)狀纖維染色－Wider染色法：可以用來(lái)顯示病變組織網(wǎng)狀支架的破壞情況。特別是在腫瘤病理診斷中，網(wǎng)狀纖維染色對(duì)于鑒別來(lái)源于上皮組織和間葉組織的惡性腫瘤具有重要價(jià)值。細(xì)胞染色步驟：①組織切片脫蠟至水。1...

2015 07-31

使用濃度對(duì)熒光PCR結(jié)果的影響

使用濃度對(duì)熒光PCR結(jié)果的影響：ELISA試劑盒SYBRGreenI的使用濃度是影響實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵因素，如果SYBRGreenI的濃度不飽和會(huì)使熒光信號(hào)不能反應(yīng)產(chǎn)物量的變化。而過(guò)高濃度則會(huì)抑制PC...

2015 07-27

免疫熒光組織化學(xué)的檢查方法

檢查抗原法：此法是免疫組織化學(xué)zui早使用的方法，用熒光素標(biāo)記已知特異性抗體，直接與組織細(xì)胞中相應(yīng)抗原結(jié)合，在熒光顯微鏡下可見(jiàn)抗原存在部位呈現(xiàn)特異性熒光。此法特異性強(qiáng)，快速而簡(jiǎn)便，但是，由于一種熒光抗...

2015 07-24

非特異性熒光染色的消除

組織的非特異性熒光染色機(jī)制很復(fù)雜，其產(chǎn)生的原因主要有：一部分熒光素末與蛋白質(zhì)結(jié)合，形成了聚合物和衍化物，不能被除去；抗體以外的血清蛋白與熒光素結(jié)合形成熒光素脲蛋白與組織成分結(jié)合；除被檢抗原以外，組織中...

2015 07-22

原位雜交組織化學(xué)探針對(duì)照

已知陽(yáng)性組織和已知陰性組織對(duì)照用探針在已知含靶核酸序列的陽(yáng)性組織和已知不含靶核酸序列的陰性組織標(biāo)本上進(jìn)行原位雜交，應(yīng)分別得到陽(yáng)性結(jié)果和陰性結(jié)果。如果已知陽(yáng)性組織出現(xiàn)陰性結(jié)果，則應(yīng)對(duì)探針的制備及原位雜交...

2015 07-20

原位雜交組織切片技術(shù)

冰凍切片在原位雜交中以冰凍切片zui常用。切片時(shí)，要盡量避免RNA酶污染，操作時(shí)需戴手套，使用70％酒精擦洗工作臺(tái)、切片機(jī)刀架、搖柄和載物臺(tái)等手常接觸的部位以及其他器械。切片厚度可根據(jù)具體情況而定。如...

2015 07-17

膠體金標(biāo)抗體的染色方法

利用兩種不同直徑的膠體金顆粒標(biāo)記兩種第二抗體，在電鏡下進(jìn)行兩種不同抗原的亞細(xì)胞定位。基本原則：首先需購(gòu)買擬研究的兩種抗原的特異性抗體，以及不同直徑金顆粒標(biāo)記的相應(yīng)第二抗體，然后在同一張載網(wǎng)上分別或同時(shí)...

2015 07-15

間接免疫熒光法操作步驟

間接法又稱為熒光抗-抗體法?需要兩種抗體參與，即一抗和二抗(熒光素標(biāo)記)。一抗對(duì)標(biāo)本中的抗原來(lái)說(shuō)起抗體的作用，但對(duì)熒光標(biāo)記的二抗來(lái)說(shuō)又起著抗原作用。–可用來(lái)檢測(cè)標(biāo)本中未知抗原，也可檢測(cè)血清中未知抗體。...

2015 07-13

熒光抗體染色間接法

間接法（1）切片固定后用毛細(xì)滴管吸取經(jīng)適當(dāng)稀釋的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的濕度，37℃作用30min。然后用0.01mol/lpH7.2PBS洗兩次，10min，用吸水吸去或吹干余留的...

2015 07-10

抗原與抗體的結(jié)合作用

抗原與抗體的結(jié)合作用抗體（Ab）和抗原(Ag)的交互作用與經(jīng)典的質(zhì)量動(dòng)力反應(yīng)學(xué)描述的雙分子反應(yīng)相似：[Ag]+[Ab]游離抗原和游離抗體可逆地反應(yīng)形成抗原-抗體復(fù)合物。重排等式可以得到一個(gè)親和力（平衡...

2015 07-08

免疫組化非特異性染色的問(wèn)題解決

①是否有效地去除了內(nèi)源性酶和*。應(yīng)注意的是，并不是每一種組織均需要進(jìn)行此步驟，但對(duì)于內(nèi)源性酶或*豐富的組織，如肝臟、腎臟等，需考慮此原因。處理的方法為：滅活堿性磷酸酶：zui常用的方法是將左旋咪唑（2...

2015 07-06

免疫組化的結(jié)果分析

DAB顯色時(shí)間如何把握？1.DAB顯色時(shí)間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時(shí)間，到出現(xiàn)淺棕色本底時(shí)即可沖洗。2.DAB顯色時(shí)間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色，這很可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)高或...

2015 07-03

環(huán)境條件影響*活性強(qiáng)弱的實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)步驟1.*的提取取已發(fā)芽的水稻或小麥種子（幼芽長(zhǎng)3～4cm）20粒，放在研缽中研磨，勻漿用100ml水分多次沖洗，集中于150ml三角瓶并充分?jǐn)嚢琛㈧o置1小時(shí)后，過(guò)濾入另一三角瓶，濾液中即含有*，...

2015 07-01

寡核苷酸與抗體的結(jié)合

寡核苷酸與抗體的結(jié)合連接用的抗體可以是特異性一抗，也可以是第二抗體或其他的連接二抗，如抗（Dig）、抗熒光素（FITC）或抗*（biotin）二抗。1．抗體的脫鹽和活化首先對(duì)抗體免疫球蛋白進(jìn)行脫鹽，然...

2015 06-29

培養(yǎng)基的質(zhì)量要求

對(duì)每一個(gè)批次產(chǎn)品取適量樣品進(jìn)行微生物污染的測(cè)試。按批量的不同選擇適量的培養(yǎng)基在適當(dāng)條件下培養(yǎng)，測(cè)定其微生物污染。生產(chǎn)商應(yīng)根據(jù)每種平板或液體培養(yǎng)基的數(shù)量，規(guī)定或建立其污染限值，并記錄培養(yǎng)基成分、制備要素...

2015 06-26

ELISA常見(jiàn)問(wèn)題及處理對(duì)策

可能原因解決方法ELISA試劑孵育的時(shí)間沒(méi)有按說(shuō)明書(shū)操作確定*化抗體，連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時(shí)間是否適當(dāng)。不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑混用重新檢查試劑的標(biāo)簽，確認(rèn)所有組分都屬于正使用...

2015 06-24

病理學(xué)展片與脫蠟技術(shù)

展片與撈片展片水溫應(yīng)在42℃至47℃之間，這主要和包埋蠟的熔點(diǎn)有關(guān),水溫過(guò)高，會(huì)引起組織細(xì)胞散開(kāi)，水溫過(guò)低，切片皺摺無(wú)法攤平。包埋蠟中如有二甲苯，也會(huì)造成石蠟溶解現(xiàn)象。而用一次性刀片切的片子，一碰到熱...

2015 06-19

建立細(xì)胞系（或株）的要求

什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞，視具體情況而定，無(wú)統(tǒng)一規(guī)定。對(duì)于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長(zhǎng)期培養(yǎng)，特別是反復(fù)傳代的細(xì)胞，常需做如下說(shuō)明：1、組...

2015 06-17

曲霉素ELISA試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)

曲霉素ELISA試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)●快速——只需要20分鐘●檢測(cè)范圍：2.0--100ng/ml（ppb）●可半定量和定量分析●可分析單個(gè)樣品，也可成批分析樣品（用于更經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)）●操作簡(jiǎn)便易處理，作用效...

2015 06-16

ELISA試劑盒標(biāo)本的采取和保存

標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部...