熒光染料-CFSE活細(xì)胞標(biāo)記

熒光染料CFSE（CFDA-SE），是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞。其基本原理如下：CFSE能夠輕易穿透細(xì)胞膜，在活細(xì)胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價結(jié)合，水解后釋放出綠色熒光。在細(xì)胞分裂增殖過程中，它的熒光強(qiáng)度會隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中，因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細(xì)胞增殖，細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。另外，CFSE標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久，它常被用來做活體細(xì)胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動的實驗。熒光探針CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，在細(xì)胞核的熒光染色zui強(qiáng)，并證實CFSE不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患。可以更快速，更準(zhǔn)確和更安全的得到想要的實驗數(shù)據(jù)。
CFSE：羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯（5- or 6-（N-Succinimidyloxycarbonyl）-3',6'-O,O'-diacetylfluorescein）
 

優(yōu)點：
1. 活體標(biāo)記：可以追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。
2. 時間長：標(biāo)記的熒光可以維持長達(dá)數(shù)周之久。
3. 安全：不需使用放射性同位素。
4. 相關(guān)性高：與H3摻入法結(jié)果一致，可代替后者。
5. 特定跟蹤：可以與細(xì)胞亞群特定抗體結(jié)合使用。
6. 簡單：操作簡單，可靠。
7. 穩(wěn)定：進(jìn)入細(xì)胞后熒光不受內(nèi)環(huán)境影響。
8. 結(jié)果客觀：對細(xì)胞生理活動沒有任何影響。
9. 經(jīng)濟(jì)實惠：費用經(jīng)濟(jì)，效率高。

用途：
1. 細(xì)胞增殖檢測（尤其是淋巴細(xì)胞的增殖檢測）。
2. 體內(nèi)示蹤。
3. 細(xì)胞熒光標(biāo)記。
4. 細(xì)胞毒性檢測。

其他：
1. 檢測儀器：熒光電鏡，流式細(xì)胞儀，CO2培養(yǎng)箱，移液器等
2. 激發(fā)波長：500nm
3. 發(fā)射波長：520nm