固相萃取-離子色譜法測定氟乙酸鈉含量

近年來，鼠藥中毒已經成為一個嚴重的社會問題和環境問題，氟乙酰胺是鼠藥中毒的主要部分之一。氟乙酰胺劇毒，進入生物體內容易轉化為氟乙酸鹽及其它物質。受害生物體內氟乙酰胺（氟乙酸鈉）含量極微，加上生物檢材成分復雜，要經過復雜的前處理過程才能將其有效的提取，分離和富集，而且氟乙酰胺（氟乙酸鈉）分子小、極性大、難揮發、沒有明顯的紫外吸收，用常規的氣相色譜（GC）和液相色譜（HPLC）不能直接檢測，必需通過衍生化，在分子中引進能被高靈敏檢測的基團，以適應于NPD和ECD等的GC檢測，或紫外和熒光的HPLC檢測；衍生化反應又可能帶來新的雜質，使色譜圖復雜化，干擾增大，氟乙酰胺類毒藥是目前檢驗難度zui大的毒物之一。

　　目前對氟乙酰胺（氟乙酸鈉）尚沒有一種統一準確的檢測方法，因此建立一種簡單、易行、靈敏、快速的定性定量測定方法，解決日益增多的氟乙酰胺類鼠藥中毒案件的偵破，查明中毒原因，尋找毒源，有效的打擊犯罪，保障廣大人民群眾的生命財產具有非常重要的意義。

　　本論文研究了用水提取，固相萃取裝置法純化、富集生物樣品中氟乙酸鈉的樣品前處理方法，用離子色譜作為監控固相萃取回收率的手段。采用C18固相萃取柱和SAX陰離子交換柱兩種不同的原理的固相萃取法，C18固相萃取柱不保留氟乙酸鈉，用來除去檢材中大部分有機干擾成分，C18固相萃取柱萃取氟乙酸鈉回收率達98～108%，血樣中的回收率在85%以上；SAX陰離子交換柱則保留氟乙酸根離子，用小體積的洗脫液洗脫而使樣品富集，能夠同時凈化和富集氟乙酸鈉。通過對固相萃取條件的優化，取得良好的萃取效果，用1.5mL的0.5mol/L的鹽酸做洗脫液，回收率為91%以上，富集倍數可達25倍，zui低能夠檢測0.001mg/L的氟乙酸鈉溶液，血樣中zui低能夠檢測到0.5mg/L，全程回收率在80%以上．

　　本論文建立了用離子色譜測定生物樣品中氟乙酸鈉含量的方法。在0.2mL血液樣品中加入1mL純水，然后用乙腈沉淀蛋白質，待蛋白質沉降后取上層清液經0.45?m過濾頭過濾，濾液注進離子色譜儀進行氟乙酸鈉的定性和定量分析。用Dionex600離子色譜儀，配合電導檢測器，DionexIon PacAS11陰離子交換色譜柱（結合相應的AG11保護柱），以2.0mmol/L的Na2B4O7溶液為淋洗液，25?L定量進樣環，測定生物樣品中的氟乙酸鈉，在0.10～10.0?g/mL濃度范圍內峰面積和質量濃度呈良好的線性范圍（r2=0.9978）,方法的檢測限為0.05ug/mL,實際測定了血液樣品的氟乙酸鈉，平均全程回收率在85%以上。該法也可用于食物和生物檢材中氟乙酸鈉的測定。本研究還對毛細管電泳測定氟乙酸鈉的方法進行了初步研究。