人鼻病毒（RhV）ELISA試劑盒說明書

本試劑盒僅供研究使用。

通用名：人鼻病毒（RhV）抗原酶聯免疫診斷試劑盒

本試劑盒定性測定人血液、或其它相關組織中鼻病毒（RhV）抗原

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫法（ELISA）測定標本中鼻病毒（RhV）。用純化的人鼻病毒（RhV）抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中鼻病毒（RhV）抗原相結合，經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的羊抗人抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中鼻病毒（RhV）抗原的存在與否。

1．標本處理：（1）血清、血漿標本：可直接檢測

（2）組織標本；用棉簽擦拭黏膜后，將棉簽浸入1ml生理鹽水中，浸泡10分鐘后，離心取上清液備用；或按相關文獻制備。

2．標本按要求制備后盡早進行實驗。如不能及時檢測，可將標本在-20℃保存一個月，但應避免反復凍融。

3．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

1.         編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.         加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照（標準品）50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.         配液：將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至1000ml后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl（或一滴），空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl（或一滴），再加入顯色劑B 50μl（或一滴），輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘

10.     終止：每孔加終止液50μl（或一滴），終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11.     測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

  試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.15

 臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.20

 陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為鼻病毒（RhV）抗原陰性

 陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為鼻病毒（RhV）抗原陽性

1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。

2．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5．底物請避光保存。

6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm

7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全。

8. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準..

     96人份/盒

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

 

廈門慧嘉生物科技有限公司專業代理眾多生命科學領域的。致力于各種ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、一抗二抗、細胞因子、生物試劑、移液器、耗材的銷售推廣及服務工作。
：      ：