內參即是內部參照，它們在各組織和細胞中的表達相對恒定，在檢測基因的表達水平變化時常用它來做參照物。其作用是校正上樣量、上樣過程中存在的實驗誤差，保證實驗結果的準確性。借助檢測每個樣品內參的量就可以用于校正上樣誤差，這樣半定量的結果才更為可信。一般要選擇一個在處理因素作用的條件下不會發(fā)生表達改變的基因作內參。
在進行基因研究的過程中,實時反轉錄 PCR也和傳統(tǒng)的mRNA定量方法如 Northern b lot技術等一樣, 要求使用參照基因以校正轉錄效率和 cDNA用量, 彌補制備過程中樣本純度和濃度的差別, 使不同樣本之間目的基因的比較成為可能,以期獲得真實可靠的結果。大多數分析方法中這些差別可通過與內參照比較處理消除。zui普通的內參照是內源性參照基因,也叫管家基因。
管家基因：又稱持家基因(house-keeping genes)生物體各類細胞中都表達，其產物是對維持細胞基本生命活動所必需的蛋白質編碼的基因。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因與核糖體蛋白基因等。是 為維持細胞基本生命活動所需而時刻都在表達的基因。
管家基因表達水平受環(huán)境因素影響較小，而是在個體各個生長階段的大多數、或幾乎全部組織中持續(xù)表達，或變化很小。它的表達只受啟動序列或啟動子與RNA聚合酶相互作用的影響，而不受其他機制調節(jié)。 管家基因高度保守并且在大多數情況下持續(xù)表達，因此管家基因常被用于分子技術--多位點基因分析。
內參基因通常是各種看家基因，在細胞內組成穩(wěn)定性表達，有助于保持細胞的功能。理想的內參基因應該滿足以下條件：1, 不存在假基因(Pseudogene)，以避免基因 DNA的擴增; 2,高度或中度表達，排除低表達; 3,穩(wěn)定表達于不同類型的細胞和組織(如正常細胞和癌細胞)，而且其表達量是近似的，無顯著性差別; 4,表達水平與細胞周期以及細胞是否活化無關;5, 其穩(wěn)定的表達水平與目標基因相似;6, 不受任何內源性或外源性因素的影響，如不受任何實驗處理措施的影響.
近年來的研究發(fā)現：這些常用內參基因均存在缺陷，在不同類型的細胞和組織 細胞增殖和器官發(fā)育的不同階段 體外培養(yǎng) 各種實驗條件等情況下它們的表達量通常變異較大。正確的選擇內參基因, 很大程度上依賴所研究的細胞或組織, 不同的試驗需要尋找適合各自試驗體系的特異性穩(wěn)定表達的內參基因。然而,合適內參基因的選擇,需要在各種類型的細胞或組織和各種試驗條件下進行比較選擇。理想的內參基因應在各種試驗條件下,各種類型的組織和細胞中均恒定表達,而且其表達量是近似的,無顯著性差別。另外要求不存在假基因以避免基因組的擴增。
