MassPrep自動酶切程序操作標準（sop）

一 開機前檢查：
1 檢查儀器臺面（DECK）上所有的實驗材料（Labware）。
2 檢查SystemWater 水桶的水位。
3 檢查恒溫循環水浴（Chiller）水箱的水位，并定期更換或填充Chiller 中的循環水。
4 倒掉廢液桶中的廢液。

二 開機步驟：
打開Chiller、Heater、儀器及計算機電源，進入WinPREP程序 ： 
1 儀器初始化
點擊菜單：[Utilites]→[Setup]→[Instrument]→[Initialize]儀器進行初始化。
2 系統管路沖洗、除氣泡
點擊菜單：[Utilites]→[Diagnostics Test]→[Flush and Wash tips]；
放置Labware(washbowl+1Through)在儀器平臺的G13位置，排液管接至廢液桶，按提示執行程序：

Deck layout OK,
run test now。 √
Flush Wash Volumes
Enter the Flush Volume(vl): 3000
Enter the Wash Volume(vl) : 3000 
>start,儀器開始沖洗管路中的氣泡，要多次沖洗直至管中*沒有氣泡。
3 執行自動酶切程序
點擊菜單：[File]→[Open]；
打開所要執行的自動酶切操作文件：
按文件圖示位置放置所需的Labware。（注意：蓋子應放在96 well ABGENE PCR 上； 所有實驗器皿應放入準確位置）， 按要求配置試劑，裝入試劑盒（瓶）；
點擊工具欄：[Execute Test]。彈出[Test Startup page]窗口, →點擊[Reset Tip Boxes],（Lid on PCR(1-96) ,Tips=1），“Fill”為添滿，“Empty”為清空， 

Name Based on file Location New/Used 
Lid on gel(1-96) Lid( on gel).rak G16 0/0
Lid on gel(97-192) Lid( on gel).rak E16 0/0
Lid on PCR(1-96) Lid( on PCR).rak C10 1/0
Lid on PCR(97-192) Lid( on PCR).rak A10 0/0
Lid on rest(1-96) Lid( on rest).rak C07 0/0
Lid on rest(97-192) Lid( on rest).rak A07 0/0
TiPS 1-96 20vl MBP disposable tips.rak C13 96/0
Tips 97-192 20vl MBP disposable tips.rak A13 96/0
Tips for li… 200vl MBP disposable tips.rak C16 96/0 
>OK
>Next
Heater Control Options
Manual Control 
Black Box Pow-R-Switch 
Packard Automated Heater Control √
>Next
Sample information
How many Coomassie-stained sample? (以8為單位輸入你的樣品數)
Position of first Coomassie-stained sample? 1
How many Silver-stained sample? (不做銀染可忽略)
Position of first Silver-stained sample? (不做銀染可忽略) 
>Next
Method Options
Remove excess liquid? √
Include Coomassie de-stain? √
Include silver de-stain?
Include reduction and alkylation? √
Include wash-dehydrate steps? √
Number of extractions? 2
Dispose of used 20µl tips? √
>Next
MALDI Options
Used Lockmass?
Spot MALDI target? √
Spot target twice? √
On-target washing?
>Start，開始執行程序。
注意事項：
1． 為避免角蛋白和其它污染，在移動labware 、dispensable tips、試劑或樣品時，請戴手套操作，在儀器運行過程中非儀器操作人員請遠離儀器。
2． 整個操作過程中的水為除去氣泡的去離子水。
3． 檢查冷卻循環儀是否打開和是否達到安全水位；檢查系統液體的水平面是否達到標志線（1/2桶的體積）；檢查廢水桶的液面，及時排水；檢查各種實際是否準確配置及正確放入位置。
4． 執行程序前，一定要對照所選執行程序檢查所有Labware的位置是否正確
5． 蓋子（lid）應放在96 well ABgene PCR （1-96）上。
6． 運行FlushLiq ，盡可能的去除系統中可能存在的氣泡。
7． 在[Reset Tip Boxes]時，要確定蓋子（lid）位置和槍頭（Tips）數量與實際位置和數量相符
8． 在儀器運行過程中如有以外情況發生，請速按儀器正前方緊急停止按扭（紅色）。
9． 在儀器關機不用時，請用儀器罩遮嚴以防止灰塵。
10． 在每次操作完成后請自覺登記，并保證操作臺面的整潔。