(一)酶活性與熱穩(wěn)定性
該酶基因全長(zhǎng)2496個(gè)堿基，編碼832個(gè)氨基酸，酶蛋白分子為 94KDa.其比活性為200000單位/mg.75～80℃時(shí)每個(gè)酶分子每秒鐘可延伸約150個(gè)核苷 酸，70℃延伸率大于60個(gè)核苷酸/秒，55℃時(shí)為24個(gè)核苷酸/秒.溫度過(guò)高(90℃以上) 或過(guò)低(22℃)都可影響Taq DNA聚合酶的活性，該酶雖然在90℃以上幾乎無(wú)DNA合成， 但確有良好的熱穩(wěn)定性，在PCR循環(huán)的高溫條件下仍能保持較高的活性.在92.5℃、95℃ 、97.5℃時(shí)，PCR混合物中的Taq DNA聚合酶分別經(jīng)130min，40min和5～6min后，仍可 保持50%的活性，實(shí)驗(yàn)表明.pcr反應(yīng)時(shí)變性溫度為95℃～20sec，50個(gè)循環(huán)后，Taq DNA聚合酶仍有65%的活性.Taq DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性是該酶用于PCR反應(yīng)的前提條 件，也是PCR反應(yīng)能迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用的原因.Taq DNA聚合酶還具有逆轉(zhuǎn)錄活性， 其作用于類(lèi)似逆轉(zhuǎn)錄酶.此活性溫度一般為65～68℃，有Mn2+存在時(shí)，其逆轉(zhuǎn)錄活性 更高.
(二)離子依賴(lài)性
aqDNA聚合酶是Mg2+依賴(lài)性酶，該酶的催化活性對(duì)Mg2+濃度非常敏感.以活性程度 很低的鮭魚(yú)精子DNA為模板，dNTP的濃度為0.7～0.8mmol/L時(shí)，用不同濃度Mg2+進(jìn)行 PCR反應(yīng)10min，測(cè)定結(jié)果為Mgcl2濃度在2.0mmol/L時(shí)該酶催化活性zui高，此濃度能zui 大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性，Mg2+過(guò)高就抑制酶活性，當(dāng)Mgcl2濃度在 10mmol/L時(shí)可抑制40～50%的酶活性.由于Mg2+能與dNTP結(jié)合而影響PCR反應(yīng)液中游離 的Mg2+濃度，因而Mgcl2的濃度在不同的反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)調(diào)整，優(yōu)化濃度.一般反應(yīng) 中Mg2+濃度至少應(yīng)比dNTP總濃度高0.5～1.0mmol/L.適當(dāng)濃度的KCL能使Taq DNA聚合 酶的催化活性提高50～60%，其zui適濃度為50mmol/L，高于75mmol/L時(shí)明顯抑制該酶 的活性.
(三)忠實(shí)性
taqDNA聚合酶具有5"→3"聚合酶活性和5"→3"外切酶活性，而無(wú)3"→5"外切活 性，它不具有Klenow酶的3"→5"校對(duì)活性.因而，在PCR反應(yīng)中如發(fā)生某些堿基的錯(cuò) 配，該酶是沒(méi)有校正功能的.Taq DNA聚合酶的堿基錯(cuò)配機(jī)率為2.1×10-4.
(四)抑制劑
低濃度的尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺(DMF)和二甲基亞砜(DMSD)對(duì)Taq DNA聚合酶的 催化活性并無(wú)影響.極低濃度的離子表面活性劑如脫氧膽胺酸鈉(小于0.06%)，十二烷 基肌氨酸鈉(小于0.02%)，十二烷基硫酸鈉(SDS，小于0.01%)幾乎可*抑制該酶的 活性.而非離子表面活性劑在較高濃度(Tween20，NP-40.和Tritox-100)如>5%時(shí)方能 抑制該酶的活性.
變性劑對(duì)TaqDNA聚合酶活性的影響
變性劑濃度 活性(%)乙醇≤3%100 10%110尿素≤0.5mol/L100 1.0mol/L118 1.5mol/L107 2.0mol/L82DMSO≤1%100 10%53 20%11DMF≤5%100 10%82 20%17甲酰胺≤1%100 15%86 20%39SDS0.001%105 0.01%10 0.1%<0.1
低濃度的NP-40(0.05%)和Tween20(0.05%)能增強(qiáng)TaqDNA聚合酶的活性.低濃度SDS對(duì) 該酶的抑制作用可加入一定濃度的NP-40和Tween20抵消.TaqDNA聚合酶可在-20℃貯 存至少6個(gè)月.
