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        大鼠肺成纖維樣細胞;RL1生長特性注意事項

        2021-7-13  閱讀(268)

        大鼠肺成纖維樣細胞;RL1復蘇操作要點:
        1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
        2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
        3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
        4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
        5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
        6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

         磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
        /蛋白激酶ATR抗體
        去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
        活化轉錄因子6抗體
        銜接蛋白β抗體
        銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體
        水通道蛋白-9抗體
        膜粘連蛋白A3抗體
        膜粘連蛋白 A4抗體
        自噬相關蛋白8A抗體
        磷酸化蛋白激酶B抗體
        磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
        磷酸化蛋白激酶B抗體
        脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體
        蛋白激酶錨定蛋白13抗體
        AP-1μ2抗體
        肥大細胞膜抑制性受體Allergin1抗體
        腦鈉通道蛋白1抗體
        肌動蛋白相關蛋白2/3復合亞單位B1抗體
        三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體
        甲胎蛋白抗體
        毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體
        ATP結合盒轉運蛋白2抗體

         



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