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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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探討 NLＲP3 在致大鼠肺纖維化中的表達(dá)及作用
2019-5-22 閱讀(469)
肺纖維化是間質(zhì)性肺炎中*常見的一種，高發(fā)于老年人群，以胸膜下肺基底部分布為主，HＲCT 上可表現(xiàn)為數(shù)量不等、范圍有限的磨玻璃影及網(wǎng)格影［1］。近年來研究發(fā)現(xiàn)，肺組 織損傷可導(dǎo)致組織蛋白酶及 ＲOS 大量釋放，誘導(dǎo)炎癥小體( NLＲP3) 高表達(dá)，參與慢性炎癥形成。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠氣管滴注制作肺纖維化模型，探討 NLＲP3 在致大鼠肺纖維化中的表達(dá)及作用機(jī)制。
1資料與方法
1． 1 一般資料
健康清潔級 Wistar 大鼠 60 只( 雌雄各半) ，6 周齡，體重 180 ～ 220 g，由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物學(xué)部提供。主要試劑及儀器: HE 染色試，NLＲP3大鼠 ELISA 試劑盒。
1． 2 實(shí)驗(yàn)方法
10% ( 3． 5 ml / kg) 腹腔注射將 Wistar 大鼠麻醉后，仰臥固定于鼠板上，剪去頸毛并消毒皮膚，無菌操作下作 長約 1 cm 的頸中切口，逐層分離暴露氣管，彎眼科鉗經(jīng)氣管下方穿過，輕抬氣管，直視下用 1 ml 注射器針頭穿刺兩軟骨環(huán)間，抬高鼠板頭端，使與桌面成 30 ～ 35 度角。保持針頭與氣道方向一致，并盡可能在氣道，B、D 組以 4 mg / kg 劑量一次性快速推注至氣管，對照組給予生理鹽水。立即拔出針頭，保持大鼠直立體位，左右來回旋轉(zhuǎn) 1 ～ 2 min，使藥液盡可能到達(dá)兩側(cè)肺部并均勻分布。手術(shù)后縫合皮膚，置 于動物室喂養(yǎng)。D 組大鼠于肺纖維化造模基礎(chǔ)上第 2 天每日腹腔注射 3 mg / kg，N、B 組大鼠注射生理鹽水作為對照。分別于造模后第 1、7、14、28 天處死大鼠。HE 染色觀察大鼠肺組織病理變化，ELISA 法檢測肺組織IL － 37 水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。
1.3 采用 SPSS22． 0 軟件進(jìn)行分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用( x珋± s) 描述，組間多重比較應(yīng)用 LSD － t 檢驗(yàn)，以 P ＜ 0. 05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié) 果
2.1 大鼠肺組織病理觀察結(jié)果
N 組大鼠肺組織氣道上皮光滑，無炎性細(xì)胞滲出，肺泡壁正常，無纖維化改變。B 組與 N 組相比，氣管周圍炎細(xì)胞浸潤，肺組織大量結(jié)構(gòu)破壞，肺泡間隔明顯增寬，膠原纖維沉積，
