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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠elisa試劑盒洗板時(shí)應(yīng)注意的六大問題
2017-6-13 閱讀(445)
小鼠elisa試劑盒洗板目的在于將特異性結(jié)合于固相上的抗原(抗體)與溫育過程中吸附的非特異性成份分離，使免疫復(fù)合物與待測抗體(抗原)呈一定比例，洗板是否合格直接影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。洗板應(yīng)嚴(yán)格按照說明控制洗板時(shí)間及洗板次數(shù)，ELISA 檢測一般用洗滌液洗板3 次，洗滌液應(yīng)嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行稀釋， 洗液應(yīng)注滿每個(gè)微孔并注意洗液不外溢，垂直甩板避免交叉污染，防止出現(xiàn)假陰性及假陽性結(jié)果。使用洗板機(jī)洗板可一定程度上避免環(huán)境污染、提高工作效率，洗滌開始時(shí)注意觀察每根吸液針是否一直插入孔底并吸干孔內(nèi)全部液體， 嚴(yán)格按照要求設(shè)置一定的洗板時(shí)間及洗板次數(shù)。洗板過程中注意沖力大小，避免沖力過大導(dǎo)致酶結(jié)合物丟失，吸光度值偏低。洗液應(yīng)根據(jù)不同的酶標(biāo)板調(diào)整注水量， 注意不要溢出孔外； 稀釋洗液所用的蒸餾水或去離子水酸堿度適中，使配出的洗液pH 在7.2~7.6 范圍內(nèi)，用非金屬容器保存，保持液體新鮮無污染、沉淀。洗板結(jié)束后將板拍干， 應(yīng)垂直扣在備好的干凈的吸水紙或毛巾上，且注意每次更新干凈的吸水紙或毛巾。
小鼠elisa試劑盒洗板時(shí)還應(yīng)注意六大問題：
(1) 需每天校正注液量及殘液量， 洗滌后殘液量不得大于2μl；
(2)及時(shí)更換破損吸液針，避免破壞底板包被；
(3)針對(duì)不同酶標(biāo)板注意調(diào)整吸液頭下降高度， 避免沖洗針頭卡住酶標(biāo)板；
(4)注意調(diào)整洗液量，洗液量過多將溢出，過少將達(dá)不到洗滌效果；
(5)關(guān)機(jī)前使用蒸餾水沖洗管道，避免洗液的結(jié)晶物堵塞管道；
(6)不同種試劑盒的洗液嚴(yán)禁混合使用。臨床操作中， 工作人員由于擔(dān)心洗板次數(shù)過少達(dá)不到去除非特異性物質(zhì)的理想效果而增加洗板次數(shù)，小鼠elisa試劑盒研究發(fā)現(xiàn)，隨著洗板次數(shù)的增加樣本檢測的OD 值降低，造成假陰性結(jié)果及灰區(qū)標(biāo)本的漏檢。
