酶消化液
1、0.1%*
試劑:* 0.1g
0.1%氯化鈣(pH7.8) 100ml
配制方法:先配制0.1%的CaCl2,用0.1mol/L的NaOH將其pH調(diào)至7.8,然后加入蛋白酶溶解之。用前將*消化液在水浴中予熱至37℃(載有標(biāo)本的玻片也在TBS中予熱至同樣樣溫度)。該消化液時(shí)間約為5~30min。細(xì)胞
2、0.4%*
試劑:* 400mg
0.1N HCl 100ml
配制方法:同*。消化時(shí)間在37℃約為30min。細(xì)胞
3、0.06% Pronase
試劑:Pronase 0.06g
0.05mol/L TB(pH7.5) 100ml
配制方法:同前。
在免疫細(xì)胞化學(xué)染色中,有時(shí)經(jīng)Formalin過度固定的標(biāo)本,常會(huì)產(chǎn)生過量的醛基,遮蓋抗原,影響一抗與抗原的結(jié)合。用蛋白酶溶液消化,可起到暴露抗原部分的作用。消化時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同組織而異,總之,在保持組織形態(tài)不被破壞的前提下,宜盡量延長(zhǎng)消化時(shí)間。以上三種酶消化液中,以*種zui為常用。