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        轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒原理

        2015年10月14日 08:59:30人氣:292來源:上海酶聯(lián)生物研究所

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        關(guān) 鍵 詞轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
        【資料簡介】

        TGF-β1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知TGF-β1濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將TGF-β1和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TGF-β1的濃度呈比例關(guān)系。

        轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
        試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
        實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
        不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
        底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
        按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

        轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
        1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
        2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的TGF-β1標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的TGF-β1含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
        3、檢測值范圍:0-400pmol/L
        4、敏感度: 1.0 pmol/L

        轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
        血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        上海酶聯(lián)生物研究所作者

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