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        技術中心

        補體成分3a受體1(C3aR1)ELISA試劑盒正確操作

        2015年09月06日 09:37:53人氣:897來源:上海紀寧實業有限公司

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        關 鍵 詞補體成分3a受體1(C3aR1)ELISA試劑盒
        【資料簡介】

        補體成分3a受體1(C3aR1)ELISA試劑盒在醫學領域上,能夠進行檢測的抗原包括:內分泌方面的雌性激素、絨毛膜促性腺激素、黃體素、胰島素、皮質醇、促甲狀腺素和孕酮等,血液學方面的凝固因子(如第Ⅷ凝固因子)、紅細胞抗原及結合球蛋白(Hapto Globin)等,腫瘤方面已試用檢查甲胎蛋白(AFP)癌胚抗原(CEA),此外還有霍亂弧菌、大腸肝菌、綠膿桿菌和破傷風梭菌毒素;腦膜炎球菌及淋球菌抗原;檢測免疫抑制病人中常見的白色念殊菌抗原,檢測病人或病獸的糞便中的輪狀病毒;檢測甲肝病毒、皰疹病毒、麻疹病毒、流感、呼吸道融合及巨細胞病毒等。

        補體成分3a受體1(C3aR1)ELISA試劑盒操作步驟】 
        1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業人員進行矯正。
        2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
        3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
        4、實驗時,要使底物避光保存。
        5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
        6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
        7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
        8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
        9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
        10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
        11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
        12、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
        13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
        14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
        15、待檢樣品要澄清,否則會影響結果。
        16、溫浴時間應遵守試劑盒規定。
        17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數據的準確性。
        18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

        【補體成分3a受體1(C3aR1)ELISA試劑盒樣本正確處理資料】
        在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行
        檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。
        液體類標本:  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
        1. 血清:
        室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
        2. 血漿:
        應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
        3. 尿液:
        用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
        4. 細胞培養上清:
        檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
        5. 培養細胞
            檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
        6. 組織標本
            切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

        上海紀寧實業有限公司作者

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