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        技術中心

        倉鼠甘油三酯(TG) ELISA試劑盒使用方法

        2015年09月02日 08:15:39人氣:185來源:江蘇晶美生物科技有限公司

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        上 傳 人江蘇晶美生物科技有限公司 需要積分0
        關 鍵 詞 ELISA試劑盒
        【資料簡介】


        本試劑盒僅供研究使用。

        檢測范圍:                                                          96T

        0.2nmol/L - 9nmol/L


        使用目的:

        本試劑盒用于測定倉鼠血清、血漿及相關液體樣本中甘油三酯(TG)含量

        實驗原理

        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中倉鼠甘油三酯(TG)水平。用純化的倉鼠甘油三酯(TG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入甘油三酯(TG)再與HRP標記的甘油三酯(TG)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甘油三酯(TG)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中倉鼠甘油三酯(TG)濃度。

        試劑盒組成

        1

        30倍濃縮洗滌液

        20ml×1

        7

        終止液

        6ml×1

        2

        酶標試劑

        6ml×1

        8

        標準品(16nmol/L

        0.5ml×1

        3

        酶標包被板

        12孔×8

        9

        標準品稀釋液

        1.5ml×1

        4

        樣品稀釋液

        6ml×1

        10

        說明書

        1

        5

        顯色劑A

        6ml×1

        11

        封板膜

        2 

        6

        顯色劑B

        6ml×1/

        12

        密封袋

        1

        標本要求

        1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

        2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

        操作步驟

        1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

        8nmol/L

        5號標準品

        150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

        4nmol/L

        4號標準品

        150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

        2nmol/L

        3號標準品

        150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

        1nmol/L

        2號標準品

        150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

        0.5nmol/L

        1號標準品

        150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液



        1. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
        2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
        3. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
        4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
        5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
        6. 溫育:操作同3
        7. 洗滌:操作同5
        8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
        9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
        10. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

        江蘇晶美生物科技有限公司作者

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