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        技術中心

        大鼠I型膠原(collagen I)ELISA試劑盒使用方法

        2015年07月01日 09:14:32人氣:212來源:江蘇科特商貿有限公司

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        關 鍵 詞大鼠I型膠原(collagen I)ELISA試劑盒
        【資料簡介】

        檢測范圍:                                                          96T

        20 ug/L -800 ug/L

        使用目的:

        本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中I型膠原(collagen I)含量

        實驗原理

        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠I型膠原(collagen I)水平。用純化的大鼠I型膠原(collagen I)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入I型膠原(collagen I)再與HRP標記的I型膠原(collagen I)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的I型膠原(collagen I)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠I型膠原(collagen I)濃度。

        試劑盒組成

        1

        30倍濃縮洗滌液

        20ml×1

        7

        終止液

        6ml×1

        2

        酶標試劑

        6ml×1

        8

        標準品(1600ug/L

        0.5ml×1

        3

        酶標包被板

        12孔×8

        9

        標準品稀釋液

        1.5ml×1

        4

        樣品稀釋液

        6ml×1

        10

        說明書

        1

        5

        顯色劑A

        6ml×1

        11

        封板膜

        2 

        6

        顯色劑B

        6ml×1/

        12

        密封袋

        1

        操作程序總結:



        計算

          以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

        注意事項

        1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

        2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

        3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,*使用排槍加樣。

           4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

           5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

           6.底物請避光保存。

           7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

           9.本試劑不同批號組分不得混用。

           10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

        江蘇科特商貿有限公司作者

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