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        植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析

        2015年05月26日 17:01:29人氣:282來源:豐壽(上海)生物科技有限公司

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        關(guān) 鍵 詞植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析,植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析
        【資料簡介】

         
        植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析
        試劑盒使用說明書
        本試劑盒僅供研究使用。
        植物槐凝集素(SJA)酶聯(lián)免疫分析檢測范圍:
        1 ng/L -40 ng/L
        使用目的:
        本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關(guān)樣本中槐凝集素(SJA)含量。
        實驗原理
        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物槐凝集素 (SJA)
        。用純化的植物槐凝集
        素(SJA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入槐凝集素(SJA),再
        與 HRP 標記的槐凝集素(SJA)抗體    ,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后
        加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃
        色。顏色的深淺和樣品中的槐凝集素(SJA)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度
        (OD值),通過標準曲線計算樣品中植物槐凝集素(SJA)濃度。
        試劑盒組成
        標本要
        1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
        馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
        2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過
        (HRP)活性。
        操作步驟
        1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
        加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

        溫育:操作同 3。
        洗滌:操作同 5。
        顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
        15分鐘.
        10.終止:每孔加終止液    50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
        11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止
        液后 15分鐘以內(nèi)進行。
        操作程序總:
        計算
        以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上
        ,根據(jù)樣品的
        OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與  OD值計算出標
        準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),

         
        即為樣品的實際濃度。
        注意事項
        1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
        用完,板條應裝入密封袋中保存。
        2.濃洗滌液可能會有
        析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響
        3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
        控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
        4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值
        大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計
        算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
        5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
        6.底物請避光保存。
        7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗
        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
        9.本試劑不同批號組分不得混用。
        保存條件及有效期
        1.試劑盒保存:;2-8℃。
        2.有效期:6個月

        豐壽(上海)生物科技有限公司作者

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