ELISA試劑盒的使用會造成膜蛋白結構

【資料簡介】

     目前在PDB里的絕大部分ELISA試劑盒膜蛋白結構是在去垢劑的環(huán)境下測定的。它的各種聚集體包括寡聚體、原纖維和纖維與老年癡呆癥的病理密切相關，研究這些聚集體的三維結構可以為揭示老年癡呆癥發(fā)生發(fā)展的機制提供分子結構基礎。楊俊課題組解析得到了在磷脂雙層膜環(huán)境下的原子水平的Aβ纖維單體的三維結構，ELISA試劑盒揭示了磷脂膜環(huán)境特別是磷脂極性頭的電荷性質(zhì)對Aβ纖維結構的影響，提供了Aβ聚集的分子機制。因此在更接近DAGK的天然膜的環(huán)境下進行結構分析有著更重要的意義。楊俊課題組利用高分辨的固體NMR多維譜得到了DAGK在接近天然膜環(huán)境的E.Coli膜上的二級結構和拓撲結構，通過對比三種去垢劑/磷脂膜環(huán)境中DAGK的二級結構，他們發(fā)現(xiàn)在膜蛋白的結構分析中去垢劑的失真。
    ELISA試劑盒磷脂膜還能影響淀粉樣蛋白的聚集機制。Aβ是一類具有39-42個氨基酸的多肽，所以但是在去垢劑的環(huán)境下的膜蛋白的結構是不是在磷脂雙分子環(huán)境下的真實結構是一個備受關注的問題。固體NMR因能夠在磷脂雙分子層的環(huán)境下解析膜蛋白的三維結構而成為證實膜蛋白結構真實性的重要工具。大腸桿菌甘油二脂激酶（DAGK）是一個重要的三跨膜蛋白，它的三維結構已經(jīng)被液體核磁共振和X-射線晶體學的方法所解析。

    但是由于這兩種方法所用的去垢劑/磷脂膜不同，得到的結構差別很大。這兩種方法都不是在DAGK的天然膜環(huán)境中進行，因此在更接近DAGK的天然膜的環(huán)境下進行結構分析有著更重要的意義。 ELISA試劑盒膜蛋白所處的磷脂膜/去垢劑環(huán)境對膜蛋白的結構和功能有重要的影響。膜蛋白結構測定手段如X-射線晶體學和液體NMR很難在磷脂雙分子膜的環(huán)境下研究膜蛋白的結構，