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        技術中心

        現貨銷售人多功能蛋白聚糖ELISA檢測試劑盒說明書

        2014年07月31日 08:55:16人氣:540來源:上海通蔚生物科技有限公司

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        關 鍵 詞人多功能蛋白聚糖ELISA檢測試劑盒
        【資料簡介】

        本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

        試驗原理:
        Versican試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知Versican濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。人多功能蛋白聚糖ELISA檢測試劑盒先將Versican和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Versican的濃度呈比例關系。

        自備材料
        1.蒸餾水。
        2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
        3.振蕩器及磁力攪拌器等。

        安全性
        1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

        操作注意事項
        1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
        2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
        3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
        4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。人多功能蛋白聚糖ELISA檢測試劑盒使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
        7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
        8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
        9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

        樣品收集、處理及保存方法
        1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        試劑的準備
        標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

        2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

        操作步驟
        1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
        2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
        3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
        9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

        局限
        6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

        試劑盒性能
        1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
        2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
        3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

        結 果 判 斷 與 分 析
        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),人多功能蛋白聚糖ELISA檢測試劑盒相應的Versican標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Versican含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

        3、檢測值范圍:0-80ng/ml

        4、敏感度: 0.1 ng/ml

        XR-E-08733    結合珠蛋白(Hpt)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt)    ,適用種屬:    Mus musculus (Mouse)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08734    結合珠蛋白(Hpt)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt)    ,適用種屬:    Rattus norvegicus (Rat)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08735    血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA)    ,適用種屬:    Homo sapiens (Human)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08736    血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA)    ,適用種屬:    Mus musculus (Mouse)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08737    血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Serum Amyloid A (SAA)    ,適用種屬:    Bos taurus; Bovine (Cattle)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08738    花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)    ,適用種屬:    Homo sapiens (Human)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08739    花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)    ,適用種屬:    Rattus norvegicus (Rat)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08740    花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)    ,適用種屬:    Mus musculus (Mouse)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08741    多功能肽酶2(LMP2)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)    ,適用種屬:    Rattus norvegicus (Rat)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08742    多功能肽酶2(LMP2)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)    ,適用種屬:    Mus musculus (Mouse)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08743    神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)    ,適用種屬:    Homo sapiens (Human)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08744    神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)    ,適用種屬:    Rattus norvegicus (Rat)    ,規格:    48T/96T
        XR-E-08745    神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)酶聯免疫吸附測定試劑盒    ,英文名:    ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)    ,適用種屬:    Mus musculus (Mouse)    ,規格:    48T/96T

         

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