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        免費(fèi)代測(cè)人結(jié)核抗體ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

        2014年06月17日 10:24:20人氣:432來(lái)源:上海通蔚生物科技有限公司

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        關(guān) 鍵 詞人結(jié)核抗體ELISA檢測(cè)試劑盒
        【資料簡(jiǎn)介】

        本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:血清或血漿

         

        試驗(yàn)原理:

        TBAb試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知TBAb濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將TBAb和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人結(jié)核抗體ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TBAb的濃度呈比例關(guān)系。

        自備材料

        蒸餾水。
        加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
        振蕩器及磁力攪拌器等。

         

        安全性

        避免直接接觸終止液和底物A、B。人結(jié)核抗體ELISA檢測(cè)試劑盒一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
        實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

         

        操作注意事項(xiàng)

        試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
        實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
        不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
        底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
        按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

         

        樣品收集、處理及保存方法

        血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

         

        試劑的準(zhǔn)備

        標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

        洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。

         

        操作步驟

        使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
        根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
        加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
        甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
        在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

         

        局限

        6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。

         

        試劑盒性能

        1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

        2. 特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

        3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

         

        結(jié) 果 判 斷 與 分 析

        1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

         

        2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的TBAb標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的TBAb含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

         

        3、檢測(cè)值范圍:0-8.0IU/ml

         

        4、敏感度: 0.01 IU/ml

        本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:血清或血漿

         

        試驗(yàn)原理

        TBAb試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知TBAb濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將TBAb和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TBAb的濃度呈比例關(guān)系。

        自備材料

        • 蒸餾水。
        • 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
        • 振蕩器及磁力攪拌器等。

         

        安全性

        • 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
        • 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        • 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

         

        操作注意事項(xiàng)

        • 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
        • 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
        • 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
        • 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
        • 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        • 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
        • 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
        • 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
        • 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

         

        樣品收集、處理及保存方法

        • 血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
        • 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        • 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        • 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

         

        試劑的準(zhǔn)備

        標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

        • 洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。

         

        操作步驟

        • 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
        • 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
        • 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
        • 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        • 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        • 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        • 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        • 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
        • 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

         

        局限

        6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。

         

        試劑盒性能

        1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

        2. 特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

        3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

         

        結(jié) 果 判 斷 與 分 析

        1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

         

        2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的TBAb標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的TBAb含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

         

        3、檢測(cè)值范圍:0-8.0IU/ml

         

        4、敏感度: 0.01 IU/ml
         

        XR-E-09053 腦型肌酸激酶(CKB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Creatine人結(jié)核抗體ELISA檢測(cè)試劑盒 Kinase, Brain (CKB) ,適用種屬: Mus musculus (Mouse) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09054 白介素4受體(IL4R)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Interleukin 4 Receptor (IL4R) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09055 分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Secretory Leukocyte Peptidase Inhibitor (SLPI) ,適用種屬: Rattus norvegicus (Rat) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09056 載脂蛋白C4(APOC4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Apolipoprotein C4 (APOC4) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09057 胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) ,適用種屬: Rhesus monkey (Simian) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09058 CD14分子(CD14)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 14 (CD14) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09059 腦啡肽(ENK)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Enkephalin (ENK) ,適用種屬: Rattus norvegicus (Rat) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09060 甲胎蛋白異質(zhì)體3(αFPL3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 3 (aFPL3) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09061 金屬硫蛋白1(MT1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Metallothionein 1 (MT1) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09062 精氨酸酶(Arg)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Arginase (Arg) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09063 巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Macrophage Stimulating Protein (MSP) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09064 Opiorphin蛋白(OPI)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Opiorphin (OPI) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09065 著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Centromere Protein B (CENPB) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09066 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Deoxyribonuclease I (DNASE1) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09067 小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1 (SNRPD1) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09068 抗核糖核蛋白抗體(Anti-RNP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Anti-Ribonucleoprotein Antibody (Anti-RNP) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09069 抗Jo1抗體(Anti-Jo1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Anti-Jo1 Antibody ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09070 抗Scl-70抗體(Anti-Scl70)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Anti-Scl 70 Antibody ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09071 抗肝腎微粒體抗體(Anti-LKMA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Anti-Liver/Kidney Microsomal Antibody (Anti-LKMA) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T
        XR-E-09072 絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶5(MAP4K5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 ,英文名: ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase Kinase 5 (MAP4K5) ,適用種屬: Homo sapiens (Human) ,規(guī)格: 48T/96T

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