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        技術中心

        免費代測人β淀粉樣蛋白1-40ELISA檢測試劑盒

        2014年04月28日 09:17:04人氣:292來源:上海通蔚生物科技有限公司

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        關 鍵 詞人β淀粉樣蛋白1-40ELISA檢測試劑盒
        【資料簡介】

        本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

         

        試驗原理:

        Aβ1-40試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).人β淀粉樣蛋白1-40ELISA檢測試劑盒已知Aβ1-40濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Aβ1-40和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Aβ1-40的濃度呈比例關系。

        自備材料

        蒸餾水。
        加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
        振蕩器及磁力攪拌器等。

         

        安全性

        避免直接接觸終止液和底物A、B。人β淀粉樣蛋白1-40ELISA檢測試劑盒一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

         

        操作注意事項

        試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
        實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
        不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
        底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
        按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

         

        樣品收集、處理及保存方法

        血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

         

        試劑的準備

        標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

        洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

         

        操作步驟

        使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
        根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
        加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
        在450nm波長處測定各孔的OD值。

         

        局限

        6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

         

        試劑盒性能

        1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

        2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。

        3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

         

        結 果 判 斷 與 分 析

        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

         

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的Aβ1-40標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Aβ1-40含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

         

        3、檢測值范圍:0-80ng/ml

         

        4、敏感度: 0.1 ng/ml

        XR-B-39110 亞銨培南一水合物 ,英文名: Imipenem Monohydrate ,CAS號: 74431-23-5 ,規格: 100mg
        XR-B-39111 亞氨基二芐 ,英文名: Iminodibenzyl ,CAS號: 494-19-9 ,規格: 25mg
        XR-B-39112 雙咪唑烷基脲 ,英文名: Imidurea ,CAS號: 39236-46-9 ,規格: 200mg
        XR-B-39113 咪唑 ,人β淀粉樣蛋白1-40ELISA檢測試劑盒英文名: Imidazole ,CAS號: 288-32-4 ,規格: 200mg
        XR-B-39114 異環磷酰銨 ,英文名: Ifosfamide ,CAS號: 3778-73-2 ,規格: 500mg
        XR-B-39115 碘苷 ,英文名: Idoxuridine ,CAS號: 54-42-2 ,規格: 250mg
        XR-B-39116 鹽酸依達比星 ,英文名: Idarubicin Hydrochloride ,CAS號: 57852-57-0 ,規格: 50mg
        XR-B-39117 布洛芬 ,英文名: Ibuprofen ,CAS號: 15687-27-1 ,規格: 750mg
        XR-B-39118 伊班膦酸鈉 ,英文名: Ibandronate Sodium ,CAS號: 138926-19-9 ,規格: 100mg

        上海通蔚生物科技有限公司作者

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