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        技術中心

        免費代測人α1-抗胰蛋白酶ELISA檢測試劑盒現(xiàn)貨銷售

        2014年04月01日 10:20:40人氣:450來源:上海通蔚生物科技有限公司

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        關 鍵 詞人α1-抗胰蛋白酶ELISA檢測試劑盒
        【資料簡介】

        本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

         

        試驗原理:

        α1-AT試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).人α1-抗胰蛋白酶ELISA檢測試劑盒已知α1-AT濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將α1-AT和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中α1-AT的濃度呈比例關系。

        自備材料

        蒸餾水。
        加樣器:5ul、10ul、人α1-抗胰蛋白酶ELISA檢測試劑盒50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
        振蕩器及磁力攪拌器等。

         

        安全性

        避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

         

        操作注意事項

        試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
        實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
        不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
        底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
        按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

         

        樣品收集、處理及保存方法

        血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

         

        試劑的準備

        標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

        洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

         

        操作步驟

        使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
        根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
        加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
        在450nm波長處測定各孔的OD值。

         

        局限

        6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

         

        試劑盒性能

        1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。人α1-抗胰蛋白酶ELISA檢測試劑盒稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

        2. 特異性:不與其它細胞因子反應。

        3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

         

        結 果 判 斷 與 分 析

        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

         

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的α1-AT標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的α1-AT含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

         

        3、檢測值范圍:0-800ug/ml

         

        4、敏感度: 1.0 ug/ml

        Sentan蛋白(SNTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16071 ELISA Kit for Sentan (SNTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        延長蛋白2(ELP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16072 ELISA Kit for Elongation Protein 2 (ELP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        脫中胚蛋白(EOMES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16073 ELISA Kit for Eomesodermin (EOMES) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        假尿苷酸合酶10(PUS10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16074 ELISA Kit for Pseudouridylate Synthase 10 (PUS10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        跨膜蛋白27(TMEM27)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16075 ELISA Kit for Transmembrane Protein 27 (TMEM27) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16076 ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
        煙堿型膽堿受體α1(CHRNα1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16077 ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 1 (CHRNa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        Toll樣受體3(TLR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16078 ELISA Kit for Toll Like Receptor 3 (TLR3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
        絲氨酸/蘇氨酸激酶39(STK39)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16079 ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 39 (STK39) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        天冬酰胺合成酶(ASNS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16080 ELISA Kit for Asparagine Synthetase (ASNS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
        鈣粘蛋白EGF LAG七經(jīng)G-型受體2(CELSR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16081 ELISA Kit for Cadherin EGF LAG Seven Pass G-Type Receptor 2 (CELSR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
        彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16082 ELISA Kit for Elastin Microfibril Interface Located Protein 2 (EMILIN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
        絡絲蛋白(RL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) M16083 ELISA Kit for Reelin (RL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

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