96T人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒

【資料簡介】

本試劑僅供研究使用  標本：血清

 

試驗原理：

AT-III試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知AT-III濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將AT-III和生物素標記的抗體同時溫育。人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中AT-III的濃度呈比例關系。

自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

操作注意事項

1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7． 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀

1． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

 

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

 

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的AT-III標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的AT-III含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

 

3、檢測值范圍：0-40IU/ml

 

4、敏感度： 0.1 IU/ml

己二酸標準品 Adipic Acid X144252 100mg 124-04-9
外消旋阿巴卡韋標準品 Abacavir Sulfate Racemic X144253 20mg 188062-50-2
阿巴卡韋相關物質A標準品 X144254 20mg 124752-25-6
阿巴卡韋相關物質B標準品 X144255 20mg
阿巴卡韋相關物質C標準品 X144256 20mg 172015-79-1
阿巴卡韋相關物質混合物標準品 X144257 15mg 136470-78-5
阿巴卡韋系統適應性混合物標準品 Abacavir Stereoisomers Mixture X144258 15mg
阿巴卡韋立體異構體混合物標準品 X144259 15mg
鹽酸醋丁洛爾標準品 Acebutolol Hydrochloride X144260 125mg 34381-68-5
醋丁洛爾相關物質A標準品 X144261 20mg 40188-45-2
醋硝香豆素標準品 Acenocoumarol X144262 200mg 152-72-7
乙酰丙嗪馬來酸鹽標準品 Acepromazine Maleate X144263 250mg 3598-37-6
安賽蜜標準品 Acesulfame Potassium 人抗凝血酶-ⅢELISA檢測試劑盒X144264 200mg 55589-62-3
對乙酰氨基酚標準品 Acetaminophen X144265 400mg 103-90-2
對乙酰氨基酚相關物質A標準品 X144266 15mg 2623-33-8
N-乙酰對氨基酚相關雜質B標準品 X144267 50mg
N-乙酰對氨基酚相關雜質C標準品 X144268 50mg