96T人白細胞介素-17ELISA檢測試劑盒使用

【資料簡介】

試驗原理：

IL-17試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-17濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將IL-17和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，人白細胞介素-17ELISA檢測試劑盒然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-17的濃度呈比例關系。

自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

人白細胞介素-17ELISA檢測試劑盒操作注意事項

1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7． 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

1． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

 

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

 

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），人白細胞介素-17ELISA檢測試劑盒相應的IL-17標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IL-17含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

 

3、檢測值范圍：0-800pg/ml

 

4、敏感度： 1.0 pg/ml
 

人白介素27（IL-27）	human Interleukin27 ELISA Kit	X06770	96T/48T
人白介素23（IL-23）	Human Interleukin23 ELISA Kit	X06771	96T/48T
人第八因子相關抗原（FVⅢAg）	Human Factor VIII-related Antigen ELISA Kit	X06772	96T/48T
人P53（P53）	Human P53 ELISA Kit	X06773	96T/48T
人環-磷鳥苷（cGMP）	Human Cyclic guanosine monophosphate ELISA Kit	X06774	96T/48T
人巨噬細胞移動抑制因子（MIF）ELISA試劑盒	Human Macrophage MigRation Inhibitory Factor ELISA Kit	X06775	96T/48T
人β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）	Human Amyloid-β-Protein（1-40） ELISA Kit	X06776	96T/48T
人組織因子途徑抑制物（TFPI）ELISA試劑盒	Human Tissue factor pathway inhibitor ELISA Kit	X06777	96T/48T
人心肌轉錄因子（GATA4）	Human GATA4 ELISA Kit	X06778	96T/48T
人干擾素誘導蛋白10（IP-10）	Human IP-10 ELISA Kit	X06779	96T/48T
人胰高糖素肽（Glp-1）	Human Glp-1 Elisa Kit	X06780	96T/48T
人膽囊收縮素（cck）ELISA試劑盒	Human Cholecystokinin ELISA Kit	X06781	96T/48T
人腦腸肽（Gehrelin）	Human Gehrelin Elisa kit	X06782	96T/48T
人磷脂酶A2（PLA2）ELISA試劑盒	Human Phospholipidase A2 ELISA Kit	X06783	96T/48T
人6-酮-前列腺素（6-keto-prostaglandin）	Human 6-keto-prostaglandin elisa kit	X06784	96T/48T
人B細胞活化因子受體（BAFF－R）	Human BAFF－R ELISA Kit	X06785	96T/48T
人B細胞活化因子（BAFF）	Human BAFF ELISA Kit	X06786	96T/48T
人載脂蛋白A1（apoA1）	Human apoA1 ELISA Kit	X06787	96T/48T
人載脂蛋白B100（apoB100）	Human apoB100 ELISA Kit	X06788	96T/48T
人III型前膠原肽（PIIINP）	Human PIIINP ELISA Kit	X06789	96T/48T