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        技術(shù)中心

        現(xiàn)貨人2,5寡腺苷酸合成酶ELISA檢測試劑盒*

        2013年11月19日 08:40:31人氣:424來源:上海通蔚生物科技有限公司

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        上 傳 人上海通蔚生物科技有限公司 需要積分0
        關(guān) 鍵 詞人2,5寡腺苷酸合成酶ELISA檢測試劑盒
        【資料簡介】

              本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿

        人2,5寡腺苷酸合成酶ELISA檢測試劑盒試驗原理:
        2,5-OAS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知2,5-OAS濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將2,5-OAS和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中2,5-OAS的濃度呈比例關(guān)系。

        自備材料
        1. 蒸餾水。
        2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
        3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

        安全性
        1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

        操作注意事項
        1. 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
        2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
        3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
        4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        6. 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
        7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
        8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
        9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

        樣品收集、處理及保存方法
        1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
        5、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        試劑的準備
        1. 標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,人2,5寡腺苷酸合成酶ELISA檢測試劑盒不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:

        400 nmol/L
        (6號標準品)
        原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
        200 nmol/L
        (5號標準品)
        100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
        100 nmol/L
        (4號標準品)
        100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        50 nmol/L
        (3號標準品)
        100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        25 nmol/L
        (2號標準品)
        100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        12.5 nmol/L
        (1號標準品)
        100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        0 nmol/L
        (空白對照)
        原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

        2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。


        操作步驟
        1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
        2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
        3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
        9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

        局限
        6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

        試劑盒性能
        1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
        2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。
        3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

        結(jié) 果 判 斷 與 分 析
        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的2,5-OAS標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的2,5-OAS含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

        3、檢測值范圍:0-400nmol/L

        4、敏感度: 1.0 nmol/L
        人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒Human Leishimaria antibody ELISA KitY3392796T/48T
        人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒Human cicatricial Pemphigoid,CP ELISA KitY3392896T/48T
        人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒human hepatitis B virus,HBV preS2Ab ELISA KitY3392996T/48T
        人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA KitY3393096T/48T
        人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒human transfusion transmitted virus,TTV ELISA KitY3393196T/48T
        人去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒Human Desmopressin/1-desamino-8-D-arginine vasopressin,dDAVP ELISA KitY3393296T/48T
        人毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒Human muscarinic acetylcholine receptor M3,M-AChR M3 ELISA Kit Y3393396T/48T
        人毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒 Human muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA KitY3393496T/48T
        人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒Human Orexin receptor,OXR ELISA KitY3393596T/48T
        人真胰島素(TI)ELISA試劑盒 Human true insulin,TI ELISA KitY3393696T/48T
        人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒Human Noradrenaline Bitartas,NE-B ELISA KitY3393796T/48T
        人前列環(huán)素(PGI)ELISA試劑盒 Human prostacycline,PGI ELISA KitY3393896T/48T
        人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒 Human ReverseTri-iodothyronine,rT3 ELISA KitY3393996T/48T
        人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒Human 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA KitY3394096T/48T
        人戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒Human Pentosidine ELISA KitY3394196T/48T
        人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒Human metanephrine,MN ELISA KitY3394296T/48T
        人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒Human Dopamine D1 receptor,D1R ELISA KitY3394396T/48T
        人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒Human adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA KitY3394496T/48T
        人早老素2(PS-2)ELISA試劑盒 Human Presenilin 2,PS-2 ELISA KitY3394596T/48T
        人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒 Human Isoprenaline Hydrochloride,iso-Hyd ELISA KitY3394696T/48T
        人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA試劑盒 Human Pancreastatin ELISA KitY3394796T/48T
        人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒 Human androgen receptor,AR ELISA KitY3394896T/48T
        人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒 Human Relaxin,RLN ELISA KitY3394996T/48T
        人長效甲狀腺刺激素(LATS)ELISA試劑盒 Human Long acting thyroid stimulator,LATS ELISA KitY3395096T/48T
        人抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin,ADH/VP/AVP ELISA KitY3395196T/48T
        人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒Human galanin,GAL ELISA KitY3395296T/48T
        人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒Human secretin receptor,SR ELISA KitY3395396T/48T
        人超敏生長激素(U S-GH)ELISA試劑盒Human Ultra Sensitive growth hormone,U S-GH ELISA KitY3395496T/48T
        人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA試劑盒Human Ultra Sensitive Prostate Specific Antigen,PSA U S ELISA KitY3395596T/48T
        人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)ELISA試劑盒Human Nandrolone Phenylpropionate,NP ELISA KitY3395696T/48T
        人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒Human 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA KitY3395796T/48T
        人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA KitY3395896T/48T
        人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA KitY3395996T/48T
        人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒Human Cystatin C,Cys-C ELISA KitY3396096T/48T
        人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒Human sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA KitY3396196T/48T
        人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒Human Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA KitY3396296T/48T
        人脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒Human Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA KitY3396396T/48T
        人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA KitY3396496T/48T
        人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒Human 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA KitY3396596T/48T
        人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒Human Big Endothelin,Big ET ELISA KitY3396696T/48T
        人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒Human intact Parathormone ,i-PTH ELISA Kit Y3396796T/48T
        人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒Human Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA KitY3396896T/48T
        人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒Human Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA KitY3396996T/48T
        人絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒Human Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA KitY3397096T/48T
        人潑尼松龍(PS)ELISA試劑盒 Human Prednisolone,人2,5寡腺苷酸合成酶ELISA檢測試劑盒PS ELISA Kit Y3397196T/48T 

        人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒Human Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit Y3397296T/48T

        上海通蔚生物科技有限公司作者

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