士鋒生物實驗動物采血實用技術

【資料簡介】

采血方法的選擇，決定于實驗的目的所需血量以及動物種類。凡用血量較少的檢驗如紅、白細胞計數、血紅蛋白的測定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破組織取毛細血管的血。當需血量較多時可作靜脈采血。靜脈采血時，若需反復多次，應自遠離心臟端開始，以免發生栓塞而影響整條靜脈。例如，研究毒物對肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂，需要比較動、動脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液pH值以及 K+、Na+、CI-離子濃度，必須采取動脈血液。 采血時要注意：⑴采血場所有充足的光線；室溫夏季保持在25-28℃，冬季，15-20℃為宜；⑵采血用具有采用部位一般需要進行消毒；⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或試管內需預先加入抗凝劑.
不同動物采血部位與采血量的關系
采血量 采血部位 動物品種 動物品種 zui大安全采血量（ml） zui小致死采血量（ml）
小 鼠 0.2 0.3
大 鼠 1 2
豚 鼠 5 10
兔 10 40
狼 狗 100 500
獵 狗 50 200
猴 15 60
　
取少量血 尾靜脈 耳靜脈 眼底靜脈叢 舌下靜脈 腹壁靜脈 冠、腳蹼皮下靜脈 大鼠、小鼠 兔、狗、貓、豬、山羊、綿羊 兔、大鼠、小鼠 兔 青蛙、蟾蜍 雞、鴨、鵝
取中量血 后肢外側皮下小隱靜脈前肢內側皮下頭靜脈 耳動脈 頸靜脈 心臟 斷頭 翼下靜脈 頸動脈 狗、猴、貓 狗、猴、貓 兔 狗、貓、兔 豚鼠、大鼠、小鼠 大鼠、小鼠 雞、鴨、鴿、鵝 雞、鴨、鴿、鵝
取大量血 股動脈、頸動脈 心臟 頸靜脈 摘眼球 狗、猴、貓、兔 狗、猴、貓、兔 馬、牛、山羊、綿羊 大鼠、小鼠

（一）小鼠、大鼠采血法
1.割（剪）尾采血 當所需血量很少時采用本法。固定動物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的溫水中數分鐘，使尾部血管充盈。再將尾擦干，用銳器（刀或剪刀）割去尾尖0.3-0.5cm，讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取，采血結束，傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口，割破尾動脈或靜脈，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。
2.鼠尾刺血法 大鼠用血量不多時（僅做白細胞計數或血紅蛋白檢查），可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7號或8號注射針頭，刺入鼠尾靜脈，拔出針頭時即有血滴出，一次可采集10～50mm3。如果反復取血，應先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐漸向近心端穿刺。
3.眼眶靜脈叢采血 采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部（大鼠采血需帶上紗手套），應防止動物窒息。當取血時左手拇指及食指輕輕壓迫動物的頸部兩側，使眶后靜脈叢充血。右手持續接7號針頭的1ml注射器或長頸（3～4cm）硬質玻璃滴管（毛細管內徑0.5-1.0mm），使與鼠面成45℃的夾角，由眼內角刺入，針頭斜面先向眼球，刺入后再轉180度使斜面對著眼眶后界。刺入濃度，小鼠約2～3mm，大鼠約4～5mm。當感到有阻力時即停止推進，同時，將針退出約0.1-0.5mm，邊退邊抽。若穿刺適當血液能自然流入毛細管中，當得到所需的血量后，即除去加于頸部的壓力，同時，將拔出，以防止術后穿刺孔出血。 若技術熟練，用本法短期內可重復采血均無多大困難。左右兩眼輪換更好。體重20-25g的小鼠每次可采血 0.2-0.3ml；體重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可適用于某些生物化學項目的檢驗。
4.斷頭取血 采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大（小）鼠的頸部皮膚，并作動物頭朝下傾的姿勢。右手用剪刀猛剪鼠頸，約1/2-4/5的頸部前剪斷，讓血自由滴入盛器。小鼠可采用約0.8～1.2ml;大鼠約5-10ml。
5.心臟采血 鼠類的心臟較小，且心率較快，心臟采血比較困難，故少用。活體采血方法與豚鼠相同。若做開胸一次死亡采血，先將動物作深麻醉，打開胸腔，暴露心臟，用針頭刺入右心室，吸取血液。小鼠約0.5-0.6ml；大鼠約0.8-1.2ml。
6.頸動靜脈采血 先將動物仰位固定，切開頸部皮膚，分離皮下結締組織，使頸靜脈充分暴露，可用注射器吸出血液。在氣管兩側分離出頸動脈，離心端結扎，向心端剪口將血滴入試管內。
7.腹主動脈采血 先將動物麻醉，仰臥固定在手術架上，從腹正中線皮膚切開腹腔，使腹主動脈清楚暴露。用注射器吸出血液，防止溶血。或用無齒鑷子剝離結締組織，夾住動脈近心端，用尖頭刀，剪斷動脈，使血液噴入盛器。
8.股動（靜）脈采血 先由助手握住動物，采血者左手拉直動物下肢，使靜脈充盈。或者以搏動為指標，右手用注射器刺入血管。體重15-20g 小鼠采血約0.2-0.8ml，大鼠約0.4-0.6ml。

（二）豚鼠采血法
1.耳緣剪口采血 將耳消毒后，用銳器（刀或刀片）割破耳緣，在切口邊緣涂抹20%檸檬酸鈉溶液，阻止血凝，則血可自切口自動流出，進入盛器。操作時，使耳充血效果較好。此法能采血0.5ml左右。
2.心臟采血 取血前應探明心臟搏動zui強部位，通常在胸骨左緣的正中，選心跳zui顯的部位作穿刺。針頭宜稍細長些，以免發生手術后穿刺孔出血，其操作手法詳見兔心臟采血。因豚鼠身體較小，一般可不必將動物固定在解剖臺上，而可由助手握住前后肢進行采血即可。成年豚鼠每周采血應不超過10ml為宜。
3.肌動脈采血 將動脈仰位固定在上，剪去腹股溝區的毛，麻醉后，局部用碘酒消毒。切開長約2-3cm的皮膚，使股動脈暴露及分離。然后，用鑷子提起股動脈，遠端結扎，近端用夾住，在動脈剪一小孔，用無菌玻璃小導管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入，放開，血液即導管口流出。一次可采血10-20ml。
4.背中足靜脈取血 助手固定動物，將其右或左右膝關節伸直提到術者面前。術者將動物腳背面用酒精消毒，找出背中足靜脈后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿的注射針刺入靜脈。拔針后立即出血，呈半球狀隆起。采血后，用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復采血時，兩后肢交替使用。

（三）兔采血法
1.耳靜脈采血 本法為zui常用的取血法之一，常作多次反復取血用，因此，保護耳緣靜脈，防止發生栓塞特別重要。 將兔放入僅露出頭部及兩耳的固定盒中，或由助手以手扶住。選耳靜脈清晰的耳朵，將耳靜脈部位的毛拔去，用75%酒精局部消毒，待干。用手指輕輕摩擦兔耳，使靜脈擴張，用連有5（1/2）號針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或將針頭逆血流方向刺入耳緣靜脈取血，取血完畢用棉球壓迫止血，此種采血法一次zui多可采血5-10ml。