藍草空氣消毒乳劑的研制及其抗菌實驗

【資料簡介】

    隨著社會進步和大眾生活水平的提高，人們對周圍環境空氣質量的要求越來越高，既需要健康衛生，又要求空氣清新，因此，保持工作和生活的環境空氣清潔、無污染，對提高人們生活質量有重要意義，是人們共同的愿望和追求。空氣清新消毒對凈化空氣、消除環境異味等有重要作用。中藥消毒是近年來興起的一項消毒技術，具有價格低廉、無毒副作用、氣味芳香、不傷害眼睛、不刺激皮膚及呼吸道黏膜等優點［1］，相關產品的研發不僅有重要的社會意義，而且有廣闊的市場前景，為此，近年來我們開展了中藥空氣清新消毒劑的研究，自行研制了一種中藥制劑——藍草空氣消毒乳劑，并對其抗菌、抗病毒作用進行了實驗。現報道如下。

    1材料

    篩選出適合空氣消毒的中藥材：*（RadixIsatidis）為十字花科植物松藍IsatisindigoticaFort的干燥根；金銀花為忍冬科植物忍冬LonicarejaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花；連翹為木犀科植物連翹ForsythiaSuspensa（Thunb.）Vahl的干燥果實；百部為百部科植物直立百部Stemonasessilifolia（Miq.）Miq.，蔓生百部S.jaqonica（Bl.）Miq或對葉百部S.tuberosaLour.的干燥塊根；廣藿香Pogostemoncablin（Blanco）Benth為唇形科植物廣藿香的干燥地上部分；薄荷（HerbaMenthae）系唇形科植物薄荷的干燥地上部分；桂枝為樟科樟屬植物肉桂CinnanumcassiaPresl的干燥嫩莖；天然香料熏衣草精油（Lavandin）。以上中藥均購自寧波市藥材公司，經鑒定符合用藥要求。

    2方法

    2.1制劑的制備

    2.1.1藥液提取及精制將薄荷、廣藿香、桂枝3味藥采用蒸餾法，提取揮發油；將金銀花、連翹、*、百部與上述藥渣混合加8倍量水，煎煮，1h/次，提取3次，合并提取液，濃縮至1g/ml，加入95%乙醇，便加邊攪拌使含醇量為70%；減壓濃縮，調pH至7.0，得濃縮液，備用。

    2.1.2乳劑的制備

    處方：①油相：硬脂酸5.0g，色拉油5.0ml，揮發油0.5ml（桂枝油0.075ml，薄荷油、藿香油各0.06ml，熏衣草油0.305ml）；②水相：三乙醇胺2.0ml，1∶1精制藥液（pH7.0）87.5ml，蒸餾水適量，溶解后定容至200ml。

    乳劑的制備：精密稱取硬脂酸5.0g，量取色拉油5.0ml，置于同一燒杯中，水浴加熱至70℃，使之熔融；另量取蒸餾水100ml，置于另一燒杯中，并向其中加入2.0ml三乙醇胺，攪拌使其溶解，水浴加熱至70℃。將油相以細流狀緩慢倒入水相中，400r/min攪拌10min，取出。待降溫至40℃時，向其中加入揮發油，300r/min攪拌至室溫即成初乳。然后向其中緩慢加入藥液87.5ml，邊加邊攪（400r/min），待藥液與初乳*混合均勻后，停止攪拌，加蒸餾水定容至200ml，即得成品乳劑（含量為0.44g/ml）。該制劑為淺棕褐色易流動、細膩均勻、有熏衣草香氣的液體。室溫自然貯藏3個月，質量穩定。

    2.2實驗室抗菌效果檢測將大腸桿菌E.coli，鏈球菌Streptococcurs，*StaphyloccousaureusRosenbach，檸檬色葡萄球菌Staphyloccouscitreus，表皮葡萄球菌Staphyloccousepidermidis標準菌株分別用肉湯稀釋，制成菌液。

    2.2.1試管法取消毒乳液一定量，加入1%氯化鈉，再加入二倍量水，加熱至沸使其破乳，置冰箱中冷卻使其分層，分取水層，加入適量（0.5%）吐溫80，制成1∶1水溶液作為樣品原液。

    校正pH至7.4～7.6，離心，分裝，高壓滅菌（8磅、15min），待涼后4℃冰箱內保存，備用。

    試管法抗菌實驗詳見表1。

    表1藍草空氣消毒乳抗菌實驗（略）

    第9管不加菌作為藥液對照，第10管不加藥作為菌液生長情況對照，置37℃溫箱中培養24h，觀察各管生長情況。

    凡能抑制試驗菌生長的zui高藥物稀釋度為該藥物對試驗菌的zui低抑制濃度。然后，分別將未生長菌的培養液再接種于適當的瓊脂平板上，如培養后重新長出試驗菌，則說明僅有抑菌作用，如沒有細菌長出則說明該藥有殺菌作用，也可依次找出zui小殺菌濃度。結果見表2。

    表2藍草空氣消毒乳抗菌測定結果（略）

    “-”為無細菌生長；“﹢”為有細菌生長

    2.2.2紙片法①*16～18h液體培養物，用無菌棉簽均勻涂布于普通平板表面，稍干，以無菌鑷子取吸有一定量藥物（樣品原液）濾紙片，直徑6mm，平置于上述已接種細菌的平板表面，置37℃培養。次日觀察含藥紙片周圍有無抑菌圈，并測量其大小。比較（樣品原液）對試驗菌株的抗菌作用（敏感性）。②將無菌普通平板培養基，放置于室內20min，蓋上平皿放置溫箱37℃培養，次日觀察周圍有無抑菌圈，比較（樣品原液）對空氣當中微生物的抗菌作用（敏感性）。

    2.3實驗室抗病毒效果檢測將Hep-2傳代細胞，接種在96孔微量細胞培養板上，置于37℃培養箱中，長成單層，將藥品稀釋成不同濃度，加入細胞中，求出藥液對細胞的無毒界限。然后，各孔分別加入所需濃度病毒液，每一病毒稀釋度各加4孔，同時設病毒對照、細胞對照、藥物對照、陽性藥對照（抗感沖劑，國藥準字：Z19993359，東北制藥集團公司沈陽第二中藥廠生產，每袋10g），置CO2培養箱內，37℃培養，每天在倒置顯微鏡下觀察，連續3d，記錄各孔變化情況。藍草消毒乳劑對病毒致細胞病變的作用見表3。

    表3藍草空氣消毒乳對病毒致細胞病變的作用（略）

    “﹢”為有抑制作用，“﹢-”為有延緩作用

    3結果

    3.1實驗室抗菌檢測結果實驗室抗菌檢測結果表明：藍草空氣消毒乳對條件致病菌及致病菌均有抑制作用。其對大腸桿菌抑菌效價為1∶16；鏈球菌抑菌效價為1∶8；*抑菌效價為1∶4；檸檬色葡萄球菌抑菌效價為1∶8；表皮葡萄球菌抑菌效價為1∶8。用紙片法試驗顯示在*周圍有明顯的抑菌圈，對抑制環境中微生物（空氣）的作用更為理想。

    3.2實驗室抗病毒檢測結果藍草空氣消毒乳（樣品原液）的1∶1濃度下，對流感病毒FM1株和腸道病毒ECHO11的致細胞病變分別具有抑制和延緩作用。
    4討論

    空氣是致病微生物傳播的重要途徑，據報道世界上有14種傳染病經空氣傳播［1］。目前，用化學或物理的方法消毒還存在許多不足。中醫藥預防外邪入侵不僅有完整的理論體系，且許多中藥在體外有較強的抗菌抗病毒作用，特別是一些芳香化濕、清熱解毒的中藥經現代藥理研究證實有廣譜抗菌作用和體內外抗病毒作用，有一些作為天然香料的花草同時又具有抗菌抗病毒作用，這是開發和研究中藥消毒劑強有力的基礎。利用中藥藥性采用*工藝提取制成空氣消毒劑，一方面起到空氣消毒作用，另一方面中草藥的芳香可以起到提神醒腦，凈化清新空氣，滿足防病、優化環境的要求。而且中藥安全、無毒、無刺激，更適合在人員密度大，易污染的環境中使用。因此，越來越受到人們的重視。

    從近年來的報道看，中藥空氣消毒劑的研究以殺滅細菌較多，而殺滅真菌、病毒的研究較少［2］。藍草空氣消毒乳選用金銀花、*、連翹、百部、薄荷、廣藿香、桂枝等藥，具有解表、清熱解毒、芳香化濕功效。本實驗表明，藍草空氣消毒乳對條件致病菌及致病菌均有抑制作用，對抑制環境中微生物（空氣）的作用更為理想。對流感病毒FM1株和腸道病毒ECHO11的致細胞病變分別具有抑制和延緩作用。熏衣草香能起到避穢，掩蓋不良異味，清新空氣的作用。國外學者研究發現熏衣草香有助于改善心肌功能［3］，不僅能誘導放松，同時可增加覺醒水平［4］。因此，本實驗自行研制的藍草空氣消毒乳劑有望在家庭居室、辦公室、會議室、學校教室、幼兒園、餐廳等人員密度較大的公共場所的空氣消毒和清新中發揮良好的作用。