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        技術中心

        人胰高血糖素( GC)試劑盒說明書報價

        2013年06月05日 17:02:58人氣:388來源:北京雅安達生物技術有限公司

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        上 傳 人北京雅安達生物技術有限公司 需要積分0
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        【資料簡介】

         

        人胰高血糖素( GC)試劑盒說明書

        檢測范圍:                                                           96T
        2pg/ml-80pg/ml
        使用目的:
        本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中胰高血糖素( GC)含量。實驗原理
        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰高血糖素( GC)水平。用純化的人胰高血糖素(GC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素(GC),再與 HRP標記的胰高血糖素( GC)抗體結合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB顯色。 TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰高血糖素( GC)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),通過標準曲線計算樣品中人胰高血糖素( GC)濃度。試劑盒組成

         

        1
        30倍濃縮洗滌液
        20ml×1
        7
        終止液
        6ml×1
        2
        酶標試劑
        6ml×1
        8
        標準品( 160pg/ml
        0.5ml×1
        3
        酶標包被板
        12孔 × 8
        9
        標準品稀釋液
        1.5ml×1
        4
        樣品稀釋液
        6ml×1
        10
        說明書
        1
        5
        顯色劑 A
        6ml×1
        11
        封板膜
        2
        6
        顯色劑 B
        6ml×1/
        12
        密封袋
        1

         

        標本要求
        1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于 -20℃保存,但應避免反復凍融
        2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。操作步驟
        1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
        2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl
        然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
        3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。
        4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
        5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。
        6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
        7.溫育:操作同 3
        8.洗滌:操作同 5
        9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻, 37℃避光顯色15分鐘.
        10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
        11.測定:以空白空調零, 450nm波長依序測量各孔的吸光度( OD值)。測定應在加終止
         

         

        80pg/ml
        5號標準品
        150µl的原倍標準品加入 150µl標準品稀釋液
        40pg/ml
        4號標準品
        150µl的 5號標準品加入 150µl標準品稀釋液
        20pg/ml
        3號標準品
        150µl的 4號標準品加入 150µl標準品稀釋液
        10pg/ml
        2號標準品
        150µl的 3號標準品加入 150µl標準品稀釋液
        5pg/ml
        1號標準品
        150µl的 2號標準品加入 150µl標準品稀釋液

         

        液后 15分鐘以內進行。操作程序總結:
        計算
        以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。注意事項
         
        1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
        2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
        3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
        4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數( n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
        5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
        6.底物請避光保存。
        7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準 .
        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
        9.本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期
        1.試劑盒保存:;2-8℃。
        2.有效期: 6個月

         

        北京雅安達生物技術有限公司作者

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