活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定試劑盒使用說(shuō)明書

【資料簡(jiǎn)介】

  活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定試劑

用于活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定的鞣酸活化試劑

僅用于體外診斷

 

 

一、應(yīng)用

活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）實(shí)驗(yàn)是檢測(cè)凝血一期因子缺乏，如因子VIII，IX，XI和XII。活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）多年來(lái)廣泛用于手術(shù)前的*檢查和肝素治療的監(jiān)測(cè)。所有內(nèi)源性凝血途徑因子對(duì)于正常的APTT都是必要的。

 

APTT同樣用于肝素治療的監(jiān)測(cè)。當(dāng)肝素含量在0.2 Units/ml或以上時(shí)APTT將會(huì)延長(zhǎng)。

 

本實(shí)驗(yàn)還可用于因子VIII，IX，XI，XII的定量檢測(cè)。

 

二、原理

APTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的是血漿的凝血時(shí)間。血漿中加入APTT試劑和氯化鈣后即開始凝血反應(yīng)，測(cè)量時(shí)間以秒計(jì)算。如因子VIII，IX，XI和XII的缺乏在40%或更嚴(yán)重時(shí)將會(huì)導(dǎo)致APTT結(jié)果的延長(zhǎng)。當(dāng)肝素與大量抗*III 存在的情況下也會(huì)導(dǎo)致APTT結(jié)果的延長(zhǎng)。

 

三、試劑

A.            試劑說(shuō)明

50420   APTT-EA，4ml

50450   APTT-EA，10ml

 

Biopool APTT-EA試劑含有作為激活劑的鞣酸，它對(duì)*的缺乏和肝素都敏感。試劑還含有兔腦的氯仿提取物和緩沖液及穩(wěn)定劑。*的含量為1.2%

 

B.            試劑準(zhǔn)備

APTT-EA試劑直接使用。

 

使用前請(qǐng)恢復(fù)至室溫并輕搖或倒置以充分混勻。

 

四、儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

在2-8℃儲(chǔ)存。不要冷凍。

 

開封后30天穩(wěn)定。避免長(zhǎng)時(shí)間加熱。

 

不要使用過(guò)期材料。

 

五、注意事項(xiàng)

所有的廢料都含有生物制劑，應(yīng)做適當(dāng)標(biāo)識(shí)并與其它廢料單獨(dú)存放。所有廢料的處置都應(yīng)依照，國(guó)家和地方的相關(guān)法規(guī)進(jìn)行。

 

實(shí)驗(yàn)應(yīng)與臨床觀察和其他實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果相結(jié)合。

 

六、樣本準(zhǔn)備

A.  抗凝劑。使用3.2%的*。

B.  樣本采集

1.       采集靜脈血。

2.       快速地將九份血和一份抗凝劑混合，將試管塞住后倒置能更好地混勻。

3.       將樣本在1500×g時(shí)離心至少15分鐘。

4.       60分鐘內(nèi)用塑料的吸液管將血漿從試管中移至塑料管。

5.       在4小時(shí)內(nèi)檢測(cè)血漿樣本；否則請(qǐng)將其在-20℃冷藏，zui多兩周，或在-70℃冷藏zui多6個(gè)月，每次使用前需解凍。

 

七.操作過(guò)程

A.            已提供材料：APTT-EA試劑（液體）

B.            還需另外準(zhǔn)備的材料（未提供）

1.       0.020 M 的氯化鈣（編號(hào)50455）

2.       手冊(cè),凝血檢測(cè)的機(jī)械或光學(xué)方法.

3.       計(jì)時(shí)器.

4.       封口膜或類似物。

5.       移液器0.1ml

6.       質(zhì)控血漿。

C.            實(shí)驗(yàn)步驟

Biopool的APTT-EA適用于手工或自動(dòng)化儀器的APTT實(shí)驗(yàn).詳見儀器說(shuō)明.

1.   將APTT-EA試劑和0.020M 的氯化鈣預(yù)熱至37℃。

2.   將雙份0.1ml的待測(cè)血漿預(yù)熱至37℃2分鐘。

3.   把已預(yù)熱的0.1ml的APTT-EA試劑加入血漿中。

4.    37℃溫育3分鐘。

5.    加入0.1ml的已預(yù)熱的0.010 M的氯化鈣

6.    記錄凝血形成的時(shí)間。

7.    以秒為單位報(bào)告凝血時(shí)間。

八、結(jié)果

計(jì)算每份待測(cè)血漿和質(zhì)控血漿重復(fù)檢測(cè)的平均凝血時(shí)間。兩次檢測(cè)的差異不應(yīng)超過(guò)5%（如超過(guò)需重復(fù)實(shí)驗(yàn)）。將APTT時(shí)間與正常值范圍一同報(bào)告出來(lái)，單位為秒。

 

質(zhì)控血漿是用以確保實(shí)驗(yàn)可變條件如溫度，試劑，儀器，移液管能夠工作正常的。建議不要將質(zhì)控品的檢測(cè)值一同報(bào)告出來(lái)。

九、質(zhì)量控制

Biopool的正常凝血質(zhì)控血清（編號(hào)50100 NCCP）和異常凝血質(zhì)控血清（編號(hào)50101-1/50102 ACCP-2）應(yīng)與病人血漿同時(shí)檢測(cè)。建議每次實(shí)驗(yàn)時(shí)都應(yīng)設(shè)置一個(gè)正常質(zhì)控和一個(gè)異常質(zhì)控。

 

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)每個(gè)質(zhì)控建立允許的實(shí)驗(yàn)日間可變質(zhì)控值范圍。

十、期望值

使用Biopool試劑進(jìn)行APTT實(shí)驗(yàn)的正常結(jié)果一般在24-33秒。但是，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)使用的試劑，儀器和技術(shù)建立自己的正常值范圍。

 

當(dāng)使用儀器，血液收集方法，抗凝劑和試劑批次等有所改變時(shí)應(yīng)調(diào)整正常值范圍。

十一、限制

特別注意應(yīng)盡量減少因容易被忽略因素而引起的變異。

 

A.樣本采集應(yīng)避免：

1．  使用玻璃管。只能使用塑料管。

2．  血液與抗凝物混合太遲。

3．  溶血或脂血

4．  已被組織凝血活酶污染

5．  將血與抗凝物以不恰當(dāng)?shù)谋壤旌稀?/span>

B.實(shí)驗(yàn)室技術(shù)

1.       在37℃時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

2.       僅使用高純水。

3.  zui適宜PH值為7.0-7.5

十二、性能特性

A.        因子敏感性

以下是使用Hillman和Lusher方法對(duì)Biopool APTT-EA試劑對(duì)各種*缺乏敏感性作的研究：

 

%因子	VIII因子	IX因子	XI因子	XII因子
100	30.9	29.3	29.6	30.5
20	39.7	37.8	40.6	35.1
10	43.5	41.7	45.9	38.6
0	63.4	58.1	63.8	65.4

 

B.        肝素敏感性

很多變化的因素都可能影響肝素化的血漿樣本的APTT時(shí)間。以下是往正常血漿中加入肝素量逐漸增多時(shí)對(duì)凝血時(shí)間的影響。實(shí)驗(yàn)是使用的Biopool APTT-EA試劑在光學(xué)法檢測(cè)儀器上進(jìn)行的，僅供參考。

 

正常 – 24-33秒

 

肝素 U/mL	凝血時(shí)間（秒）
0	30.4
0.1	32.9
0.2	37.4
0.3	42.8
0.4	50.0
0.5	56.7
0.6	65.7
0.7	77.7
0.8	92.2

 

病人血漿標(biāo)本凝血時(shí)間超過(guò)35秒視為異常。

十三、危險(xiǎn)和安全性

           

           

            危險(xiǎn)：*

R22   吞服有害

R32   與酸接觸釋放有毒氣體

S36   穿戴適當(dāng)?shù)?