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        技術中心

        大鼠血管活性腸肽(VIP)技術標準

        2013年03月22日 15:53:20人氣:628來源:上海研盟生物科技有限公司

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        關 鍵 詞大鼠血管活性腸肽,VIP,試劑盒,說明書
        【資料簡介】

        大鼠血管活性腸肽(VIP)標本要求
        1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
        馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
        2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP )活性。
        大鼠血管活性腸肽(VIP)操作步驟
        1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
        釋。
        160ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
        80ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
        40ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
        20ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
        10ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
        2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
        待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,
        2
        然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
        量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
        3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30 分鐘。    
        4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用。
        5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此
        重復5 次,拍干。
        6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
        7. 溫育:操作同 3。
        8. 洗滌:操作同 5。
        9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50 μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
        15分鐘。
        10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
        11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止
        液后15分鐘以內進行。

        如有需要,我們將竭城為顧客提供售前,售中,售后的服務!
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        上海研盟生物科技有限公司 作者

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