熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG相關(guān)知識

【資料簡介】

熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG相關(guān)知識

Anti-TSARG7/FITC  熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG

Anti-TSFP1/SP1 /FITC  熒光素標記SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗體IgG

Anti-tsg101/FITC  熒光素標記tsg101抗體IgG

Anti-TSHR/FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG

Anti-TSHR（CT）/FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體（C端）IgG

Anti-TSHR /FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG

Anti-TSHR（NT）/FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體（N端）IgG

Anti-TSLC1/FITC  熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG

Anti-TSLP/FITC  熒光素標記淋巴細胞生成素-1抗體IgG

Anti-TTF-1/FITC  熒光素標記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強子結(jié)合蛋白抗體IgG

Anti-TTF-2/FITC  熒光素標記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgG

Anti-Tubb3/FITC  熒光素標記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgG

Anti-Tubulin-α/FITC  熒光素標記微管蛋白α抗體IgG

Anti-Tubulin-β/FITC  熒光素標記微管蛋白抗體IgG

Anti-Tubulin-β/FITC  熒光素標記微管蛋白抗體IgG

Anti-β-Actin/HRP  辣根過氧化物酶標記β-肌動蛋白（抗體）

Anti-Tubulin-γ/FITC  熒光素標記微管蛋白-γ抗體IgG

免疫檢測
一抗與靶蛋白的結(jié)合
① 封閉的膜用PBST漂洗2-3次。
② 將加樣槽洗滌干凈，用蒸餾水潤洗，晾干，將膜用一次性手套覆蓋好，按標記和實驗設(shè)計切下膜條（一般為3 mm寬左右）按順序置于加樣槽中，作好實驗記錄，加入相應(yīng)的一抗約1ml，注意保證膜的所有部分同溶液接觸。
③ 室溫下于搖床孵育2h或4℃過夜。
④ 棄去一抗，膜條仍置于加樣槽，每個槽加2-3 mlPBST，上搖床洗滌洗滌5-10min ，換液，反復(fù)4次。
  酶標記二抗與一抗的結(jié)合
① 根據(jù)實驗需要和設(shè)計選擇合適的酶標二抗和稀釋濃度（用含0.5%脫脂奶粉的PBS稀釋），每個加樣槽中加入二抗1ml左右室溫下于搖床孵育1h或4℃過夜，注意保證膜的所有部分同溶液接觸。
②棄去二抗，膜條仍置于加樣槽，每個槽加2-3 mlPBST，上搖床洗滌洗滌5-10min ，換液，反復(fù)4次。

顯色反應(yīng)（注：二抗一般有兩種常用標記酶，HRP和AP，其相對應(yīng)的顯色底物試劑盒為DAB和BCIP/NBT）
① HRP標記二抗顯色
   用DAB KIT（KPL LOT NO YM107 CAT：54-10-00）顯色，按順序依次加Tris Buffer 3滴，DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸餾水中，避光，混勻，將膜加入顯色液中避光顯色15 min左右終止反應(yīng)，記錄實驗結(jié)果，將NC膜晾干掃描保存
②        AKP標記二抗顯色
   用AKP緩沖液洗膜5min，棄去AP緩沖液，加入顯色液（66µlNBT溶液同10mlAKP緩沖液充分混合均勻后加入33µl BCIP溶液1h內(nèi)使用），室溫下顯色（37℃可加速反應(yīng)），顯色反應(yīng)通常在30min內(nèi)可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜終止反應(yīng),記錄實驗結(jié)果，將NC膜晾干掃描保存。反應(yīng)溶液可預(yù)先配置，可在4℃儲存一年以上。

Anti-TSARG7/FITC  熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG

Anti-TSFP1/SP1 /FITC  熒光素標記SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗體IgG

Anti-tsg101/FITC  熒光素標記tsg101抗體IgG

Anti-TSHR/FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG

Anti-TSHR（CT）/FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體（C端）IgG

Anti-TSHR /FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG

Anti-TSHR（NT）/FITC  熒光素標記促甲狀腺素受體抗體（N端）IgG

Anti-TSLC1/FITC  熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG

Anti-TSLP/FITC  熒光素標記淋巴細胞生成素-1抗體IgG

Anti-TTF-1/FITC  熒光素標記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強子結(jié)合蛋白抗體IgG

Anti-TTF-2/FITC  熒光素標記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgG

Anti-Tubb3/FITC  熒光素標記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgG

Anti-Tubulin-α/FITC  熒光素標記微管蛋白α抗體IgG