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        辣根過氧化物酶標記V5 tag標簽抗體IgG,Anti-V5 tag/HRP

        2013年02月28日 14:18:32人氣:384來源:上海安研商貿有限公司

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        關 鍵 詞辣根過氧化物酶標記V5 tag標簽抗體IgG,Anti-V5 tag/HRP,Anti-V5 tag
        【資料簡介】

        辣根過氧化物酶標記V5 tag標簽抗體IgG,Anti-V5 tag/HRP

        免疫檢測
        一抗與靶蛋白的結合
        封閉的膜用PBST漂洗2-3次。
        將加樣槽洗滌干凈,用蒸餾水潤洗,晾干,將膜用一次性手套覆蓋好,按標記和實驗設計切下膜條(一般為3 mm寬左右)按順序置于加樣槽中,作好實驗記錄,加入相應的一抗約1ml,注意保證膜的所有部分同溶液接觸。
        室溫下于搖床孵育2h4過夜。
        棄去一抗,膜條仍置于加樣槽,每個槽加2-3 mlPBST,上搖床洗滌洗滌5-10min ,換液,反復4次。
          
        酶標記二抗與一抗的結合
        根據實驗需要和設計選擇合適的酶標二抗和稀釋濃度(用含0.5%脫脂奶粉的PBS稀釋),每個加樣槽中加入二抗1ml左右室溫下于搖床孵育1h4過夜,注意保證膜的所有部分同溶液接觸。
        棄去二抗,膜條仍置于加樣槽,每個槽加2-3 mlPBST,上搖床洗滌洗滌5-10min ,換液,反復4次。

        顯色反應(注:二抗一般有兩種常用標記酶,HRPAP,其相對應的顯色底物試劑盒為DABBCIP/NBT
        HRP標記二抗顯色
           
        DAB KITKPL LOT NO YM107 CAT54-10-00)顯色,按順序依次加Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3,Peroxide solution 2滴于5ml蒸餾水中,避光,混勻,將膜加入顯色液中避光顯色15 min左右終止反應,記錄實驗結果,將NC膜晾干掃描保存
                AKP標記二抗顯色
           
        AKP緩沖液洗膜5min,棄去AP緩沖液,加入顯色液(66&micro;lNBT溶液同10mlAKP緩沖液充分混合均勻后加入33&micro;l BCIP溶液1h內使用),室溫下顯色(37可加速反應),顯色反應通常在30min內可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜終止反應,記錄實驗結果,將NC膜晾干掃描保存。反應溶液可預先配置,可在4儲存一年以上。

        Anti-V5 tag/HRP  辣根過氧化物酶標記V5 tag標簽抗體IgG
        Anti-V.cholera Ogawa/FITC  熒光素標記01群小川型霍亂弧菌抗體IgG
        Anti-VCP/p97 /FITC  熒光素標記抗含纈酪肽蛋白抗體IgG
        Anti-V.cholera Ogawa/Biotin  *化01群稻葉型霍亂弧菌抗體IgG
        Anti-V.cholera Ogawa/Biotin  *化01群小川型霍亂弧菌抗體IgG
        Anti-Influenza A Virus H1/HRP  辣根過氧化物酶標記羊抗季節性A型流感病毒H1抗體IgG
        Anti-Influenza A Virus H3/HRP  辣根過氧化物酶標記羊抗季節性流感病毒H3抗體IgG
        Anti-H1N1-A/HRP(Influenza A virus)California  辣根過氧化物酶標記兔抗季節性A型人流感病毒H1N1抗體IgG(美國加州型)
        Anti-CD4/Biotin  *化CD4抗體IgG
        Anti-VDAC/FITC  熒光素標記電壓依賴性陰離子通道抗體IgG
        Anti-CD14/Biotin  *化CD14抗體IgG
        Anti-VEGF/FITC  熒光素標記VEGF抗體IgG
        Anti-VEGF(Rabbit)/FITC  熒光素標記血管內皮生長因子抗體IgG
        Anti-VEGF-A/FITC  熒光素標記血管內皮生長因子A抗體IgG

        上海安研商貿有限公司作者

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