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        技術中心

        96T人一氧化氮ELISA 檢測試劑盒內容及其配制

        2012年12月07日 16:55:02人氣:658來源:上海通蔚生物科技有限公司

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        關 鍵 詞人一氧化氮ELISA 檢測試劑盒
        【資料簡介】

         

         


        上海信然生物技術有限公司ELISA試劑盒試劑盒專賣商貿專業供應葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證,若存在質量問題,我們無條件包退換

         

        人一氧化氮ELISA 檢測試劑盒

        試驗原理:
        NO試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知NO濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將NO和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中NO的濃度呈比例關系。

         

        安全性
        1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

        人一氧化氮ELISA 檢測試劑盒

        操作注意事項
        1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
        2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
        3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
        4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
        7. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
        8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
        9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

        樣品收集、處理及保存方法
        1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
        5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

         

        人一氧化氮ELISA 檢測試劑盒

        操作步驟
        1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
        2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
        3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
        9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。


        6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

        試劑盒性能
        1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
        2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
        3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

        人一氧化氮ELISA 檢測試劑盒

        結 果 判 斷 與 分 析
        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的NO標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的NO含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

        3、檢測值范圍:0-80umol/L

        4、敏感度: 0.1 umol/L

        2-Chloroaniline 2-氯苯胺 [95-51-2] 500ml
        3-Chloroaniline 間氯苯胺 [108-42-9] 100ml
        4-Chloroaniline 對氯苯胺 [106-47-8] 250g
        2-Chlorobenzaldehyde 2-氯苯甲醛 [89-98-5] 100g
        3-Chlorobenzaldehyde 3-氯苯甲醛 [587-04-2] 100g
        Chlorogenic acid 綠原酸 [327-97-9] 250mg
        Chlorobenzene 氯化苯 [108-90-7] 500g
        2-Chlorobenzoic acid 2-氯苯甲酸 [118-91-2] 100g
        3-Chlorobenzoic acid 3-氯苯甲酸 [535-80-8] 25g
        4-Chlorobenzoic acid 4-氯苯甲酸 [74-11-3] 100g
        1-Chlorobutane (Butyl chloride) 1-氯丁烷 [109-69-3] 500ml
        Chlorocholine chloride 氯化-2-氯乙基*銨 [999-81-5] 100g
        4-Chlorocinnamic acid 4-氯肉桂酸 [1615-02-7] 250g
        2-Chloroethanesulfonic acid sodium salt 2-氯乙基磺酸鈉 [15484-44-3] 10g
        Cinnamyl alcohol 肉桂醇 [104-54-1] 250g
        Citrazinic acid 檸嗪酸 [99-11-6] 10g
        L-Citrulline L-瓜氨酸 [372-75-8] 250g
        Chrysophenine 直接黃 12 [2870-32-8] 25g
        5-Chloroindole 5-氯吲哚 [17422-32-1] 5g
        2-Chloro-5-nitrobenzaldehyde 5-硝基-2-氯苯甲醛 [6361-21-3] 100g
        1-Chloro-2-nitrobenzene 1-氯-2-硝基苯 [88-73-3] 100g
        1-Chloro-3-nitrobenzene 1-氯-3-硝基苯 [121-73-3] 50g
        1-Chloro-4-nitrobenzene 1-氯-4-硝基苯 [100-00-5] 50g
        4-Chloro-3-nitrobenzoic acid 4-氯-3-硝基苯甲酸 [96-99-1] 50g
        2-Chlorophenol 鄰氯苯酚 [95-57-8] 100g
        4-Chlorophenol 對氯苯酚 [106-48-9] 500g
        Chlorophenol red 氯酚紅 [4430-20-0] 50g

         

        若需要了解試劑盒的詳細信息,請:謝
        :,

         

         

         

         

         

         

         

        上海通蔚生物科技有限公司作者

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