大鼠癌胚抗原（CEA）說明書

【資料簡介】

大鼠癌胚抗原（CEA）使用目的：：： ：
本試劑盒用于測定大鼠血清、腦脊液及相關(guān)液體樣本中癌胚抗原（CEA）含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠癌胚抗原（CEA）水平。用純化的抗體包被
微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入癌胚抗原（CEA），再與HRP標(biāo)記的
抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在
HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的
癌胚抗原（CEA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲
線計(jì)算樣品中大鼠癌胚抗原（CEA）濃度。  
大鼠癌胚抗原（CEA）試劑盒組成 
1  30倍濃縮洗滌液  20ml×1瓶  7  終止液  6ml×1瓶
2  酶標(biāo)試劑  6ml×1瓶  8  標(biāo)準(zhǔn)品（48 ng/ml）  0.5ml×1瓶
3  酶標(biāo)包被板  12孔×8條  9  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液  1.5ml×1瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1瓶  10  說明書  1份
5  顯色劑A液  6ml×1瓶  11  封板膜  2張    
6  顯色劑B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 個(gè)
大鼠癌胚抗原（CEA）標(biāo)本要求  
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠癌胚抗原（CEA）操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
24ng/ml  5號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12 ng/ml  4號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6ng/ml  3號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3 ng/ml  2號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5 ng/ml  1號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 
 
2.  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，
 
 
然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。      
4.  配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此
重復(fù)5次，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。  
7.  溫育：操作同3。
8.  洗滌：操作同5。
9.  顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10分鐘.
10.  終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.  測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。  測定應(yīng)在加終止
液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。