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        技術中心

        96T人高遷移率族蛋白B1ELISA 檢測試劑盒試劑的準備

        2012年11月14日 15:11:46人氣:272來源:上海通蔚生物科技有限公司

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        關 鍵 詞人高遷移率族蛋白B1ELISA 檢測試劑盒
        【資料簡介】

        人高遷移率族蛋白B1ELISA 檢測試劑盒


        本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

        上海信然生物技術有限公司專業供應葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證,若存在質量問題,我們無條件包退換。
         
        試驗原理:
            HMG-B1試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知HMG-B1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將HMG-B1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中HMG-B1的濃度呈比例關系。
         
        安全性
        避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

        人高遷移率族蛋白B1ELISA 檢測試劑盒

        操作注意事項
        試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
        實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
        不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
        底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
        按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

        樣品收集、處理及保存方法
        血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
        保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
         
        人高遷移率族蛋白B1ELISA 檢測試劑盒

        操作步驟
        使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
        根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
        加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
        在450nm波長處測定各孔的OD值。
         
        6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

        試劑盒性能
        1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
        2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
        3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

        人高遷移率族蛋白B1ELISA 檢測試劑盒

        結 果 判 斷 與 分 析
        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的HMG-B1標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的HMG-B1含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

        3、檢測值范圍:0-80ng/ml

        4、敏感度: 0.1 ng/ml

        NK-2R(Neurokinin A receptor; SKR; Substance-K receptor) 神經激肽A受體/K物質受體抗體 0.2ml
        NKA(Neurokinin A) 神經激肽A抗體 0.2ml
        Streptavidin/PE 熒光素PE標記鏈霉親和素 0.1ml
        Avidin/PE 熒光素PE標記親合素 0.1ml
        rec Protein A/PE 熒光素PE標記重組純化蛋白A 0.1ml
        human CD16 Monoclonal antibody/FITC 熒光素FITC 標記的抗人CD16 單抗 100T
        human CD25 Monoclonal antibody/FITC 熒光素FITC 標記的抗人CD25 單抗 100T
        human CD34 Monoclonal antibody/FITC 熒光素FITC 標記的抗人CD34 單抗 100T
        NKG2A/CD159a/KLRC1 NK細胞受體2A/自然殺傷細胞活化性受體2A抗體 0.2ml
        NKG2C(Natural killer cell group 2C) NK細胞受體2C/自然殺傷細胞活化性受體2C抗體 0.2ml
        NKG2D/CD314/KLRK1(Natural killer cell group 2D) NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體抗體 0.2ml
        NKR(Neuromedin B Receptor) 神經激肽B受體抗體 0.2ml
        NKR/Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor/NK-4 receptor) 神經激肽-B受體抗體 0.2ml
        Nm23/(Nucleoside dIPhosphatase kinase A) 腫瘤轉移抑制基因抗體 0.1ml
        Nm23/(Nucleoside dIPhosphatase kinase A) 腫瘤轉移抑制基因抗體 0.2ml


        若需要了解試劑盒的詳細信息,請::謝
        :,


        上海通蔚生物科技有限公司作者

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