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        技術中心

        免費代測大鼠睪酮ELISA 檢測試劑盒南昌,九江

        2012年07月02日 17:41:31人氣:765來源:上海通蔚生物科技有限公司

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        關 鍵 詞大鼠睪酮ELISA 檢測試劑盒
        【資料簡介】

        大鼠睪酮ELISA 檢測試劑盒南昌,九江

         本試劑僅供研究使用      標本:血清或血漿

        試驗原理:
         TESTO試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知TESTO濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將TESTO和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中TESTO的濃度呈比例關系。
         
        試劑盒內容及其配制
        試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
        96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
        塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
        標準品:8.0ng/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
        空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
        標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
        生物素標記的抗TESTO抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
        洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
        底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

        自備材料
        蒸餾水。
        加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
        振蕩器及磁力攪拌器等。

        大鼠睪酮ELISA 檢測試劑盒南昌,九江

        安全性
        避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

        操作注意事項
        試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
        實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
        不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
        底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
        按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

        大鼠睪酮ELISA 檢測試劑盒南昌,九江

        樣品收集、處理及保存方法
        血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
        保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        試劑的準備
        標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
        8.0 ng/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
        4.0 ng/ml (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
        2.0 ng/ml (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        1.0 ng/ml (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        0.5 ng/ml (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        0.25 ng/ml (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        0 ng/ml (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

        洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。


        操作步驟
        使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
        根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
        加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
        在450nm波長處測定各孔的OD值。

        6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

        大鼠睪酮ELISA 檢測試劑盒南昌,九江

        試劑盒性能
         1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
        2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
        3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

        結 果 判 斷 與 分 析
        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的TESTO標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的TESTO含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

        3、檢測值范圍:0-8.0ng/ml

        4、敏感度: 0.01 ng/ml5-(p-Dimethylaminobenzal) rhodanine 玫瑰紅銀試劑 [536-17-4] 25g
        2-(Dimethylamino)ethyl methacrylate 甲基丙烯酸二甲氨乙酯 [2867-47-2] 100g
        3-(Dimethylamino)phenol 3-羥基-N,N-二甲基苯胺 [99-07-0 ] 100g
        4-Dimethylaminopyridine 對二甲氨基吡啶 [1122-58-3] 250g
        2,4-Dimethylaniline 2,4-二甲基苯胺 [95-68-1] 250ml
        2,6-Dimethylaniline 2,6-二甲基苯胺 [87-62-7] 250ml
        DATC 50% Solution 十二烷基-*基-氯化銨50% / 500ml
        DNase II, Pocine Pancreas 脫氧核糖核酸酶II [9025-64-3] 80KU
        Furaltadone 呋喃它酮 [139-91-3] 100g
        2,4-Dimethylbenzoic acid 2,4-二甲基苯甲酸 [611-01-8] 100g
        Recombinant Human MIG/CXCL9 (rHuMIG/CXCL9) 5ug
        Recombinant Human IP-10/CXCL10 (rHuIP-10/CXCL10) 5ug
        Recombinant Human I-TAC/CXCL11 (rHuI-TAC/CXCL11) 5ug
        Recombinant Human Fractalkine/CX3CL1 (rHuFractalkine/CX3CL1) 5ug
        Recombinant Human MCP-2/CCL8 (rHuMCP-2/CCL8) 2ug
        Recombinant Human MCP-4/CCL13 (rHuMCP-4/CCL13) 5ug
        Recombinant Human MIP-5/CCL15 (rHuMIP-5/CCL15) 5ug
        Recombinant Human LEC/NCC-4 (CCL16) (rHu LEC/NCC-4/CCL16) 5ug
        Recombinant Human MIP-4/CCL18 (rHuMIP-4/CCL18) 2ug
        Recombinant Human MIP-3 alpha/CCL20 (rHuMIP-3a/CCL20) 5ug
        Recombinant Murine SDF-1 beta /CXCL12 (rMuCXCL12) 2ug
        Recombinant Human Parathyroid Hormone 1-34( rHuPTH1-34 ) 重組激素 100ug

         

        上海通蔚生物科技有限公司作者

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