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        技術中心

        現貨 人可溶性白介素2受體(sIL-2R)ELISA 檢測試劑盒蘇州

        2012年04月28日 09:49:02人氣:733來源:上海酶聯生物研究所

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        關 鍵 詞 人可溶性白介素2受體(sIL-2R)ELISA 檢測試劑盒
        【資料簡介】

         人可溶性白介素2受體(sIL-2R)ELISA 檢測試劑盒蘇州
         本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

        試驗原理:
         sIL-2R試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知sIL-2R濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將sIL-2R和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中sIL-2R的濃度呈比例關系。
         人可溶性白介素2受體(sIL-2R)ELISA 檢測試劑盒蘇州
         
        試劑盒內容及其配制
        試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
        96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
        塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
        標準品:240pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
        空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
        標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
        *標記的抗sIL-2R抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
        洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
        底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
        標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

        自備材料
        蒸餾水。
        加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
        振蕩器及磁力攪拌器等。

        安全性
        避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
        實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

        操作注意事項
        試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
        實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
        不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
        使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
        使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
        底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
        加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
        按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

        樣品收集、處理及保存方法
        血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
        保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        試劑的準備
        標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
        240 pg/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
        120 pg/ml (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
        60 pg/ml (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        30 pg/ml (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        15 pg/ml (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        7.5 pg/ml (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
        0 pg/ml (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

        洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。


        操作步驟
        使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
        根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
        加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
        每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
        取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
        在450nm波長處測定各孔的OD值。

        建議使用的實驗方案
         標準品濃度(pg/ml) 
        A 240 240 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
        B 120 120 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
        C 60 60 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
        D 30 30 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
        E 15 15 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
        F 7.5 7.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
        G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
        H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品


        局限
        6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

        試劑盒性能
         1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
        2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
        3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

        結 果 判 斷 與 分 析
        1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

        2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的sIL-2R標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的sIL-2R含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

        3、檢測值范圍:0-240pg/ml

        4、敏感度: 0.1 pg/ml 白細胞共同抗原 LCA/CD45ELISA試劑盒 
         CD4分子 CD4ELISA試劑盒 
         P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白 P-cadELISA試劑盒 
         角化細胞生長因子 KGFELISA試劑盒 
         血小板衍生生長因子BB PDGF-BBELISA試劑盒 
         CXC趨化因子配體16 CXCL16ELISA試劑盒 
         CXC趨化因子受體3 CXCR3ELISA試劑盒 
         γ干擾素誘導蛋白16/p16 IFI16/p16ELISA試劑盒 
         基質細胞衍生因子1a SDF-1a/CXCL12ELISA試劑盒 
         淋巴細胞趨化因子 Lptn/LTN/XCL1ELISA試劑盒 
         α干擾素 IFN-αELISA試劑盒 
         可溶性CD86 B7-2/sCD86ELISA試劑盒 
         白介素27 IL-27ELISA試劑盒 
         白介素23 IL-23ELISA試劑盒 
         巨噬細胞移動抑制因子 MIFELISA試劑盒 
         組織因子途徑抑制物 TFPIELISA試劑盒 
         干擾素誘導蛋白10 IP-10/CXCL10ELISA試劑盒 
         

        上海酶聯生物研究所作者

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