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        革蘭氏染色

        2012年01月05日 11:48:39人氣:609來源:上海研生實業(yè)有限公司

        資料類型doc文件資料大小8704
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        關 鍵 詞革蘭氏染色,革蘭氏染色,革蘭氏染色,革蘭氏染色
        【資料簡介】

        一、目的和要求
        1.了解革蘭氏染色法原理及其在細菌分類鑒定中的重要性。
        2.掌握革蘭氏染色的基本步驟。
        二、原理
        G+、G-細菌的細胞壁成分和結構不同。G+的CW主要有肽聚糖形成的網(wǎng)狀結構組成,在染色過程中,當用95%乙醇處理時,由于脫水而引起網(wǎng)狀結構中的孔徑變小,CW通透性降低,使結晶紫-碘復合物被保留在CW內而不易脫色,因此呈藍紫色。G-的CW中肽聚糖含量低,脂類物質含量高,當用乙醇處理時,脂類物質溶解,CW的通透性增加,使結晶紫-碘復合物容易被乙醇抽提出來而脫色,然后又被染上了復染劑的顏色,因此呈現(xiàn)紅色。

         

        三、 菌種:大腸桿菌、*
        染液:革蘭氏染液
        四、操作
        具體步驟
        制片——固定——初染(結晶紫染液)1-2min——水洗——媒染(碘液)1min——水洗——脫色(95%乙醇至無色——水洗——復染(番紅或復紅染液)1-2min——水洗——干燥——鏡檢
        革蘭氏染色的關鍵環(huán)節(jié)
        涂片不宜過厚,以免脫色不*,造成假陽性。
        乙醇脫色時間
        菌齡:應選擇活躍生長期的幼培養(yǎng)物作。培養(yǎng)時間過長,或死亡及部分自溶,改變了細菌CW的通透性,造成陽性菌的假陰性反應。
        火焰固定不宜過熱
        媒染劑的作用
        媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或吸附力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使之不易脫落。
        五、實驗報告
        簡述各菌株的染色結果,并分別繪圖示其形態(tài)特征。
        六、預習
        細菌的芽孢染色法

        上海研生實業(yè)有限公司作者

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