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        培養基
        培養基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標準血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養基 即用型液體培養基 一次性培養基平板 顯色培養基 臨床培養基 菌種保存培養基 四環素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養基 維生素檢測培養基 一次性衛生用品衛生檢測培養基 罐頭食品商業無菌檢測培養基 飲用水及水源檢測培養基 藥品、生物制品檢測培養基 化妝品檢測培養基 動物細胞培養基 啤酒檢驗培養基 軍團菌檢測培養基 支原體檢測培養基 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗培養基 彎曲桿菌檢驗培養基 產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養基 阪崎腸桿菌檢驗培養基 溶血性鏈球菌檢測培養基 李斯特氏菌檢測培養基 弧菌檢測培養基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養基 酵母、霉菌檢測培養基 檢測培養基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養基 細菌總數檢測,增菌培養基
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        細胞
        菌株
        血清
        細胞分離試劑
        試劑盒

        動物細胞融合

        時間:2014-12-29閱讀:645
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        胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下,體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50 年,現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫,腫瘤及細胞工程的重要手段。在誘導物(如仙臺病毒,聚乙二醇)作用下,相互融合的細胞發生凝集,隨后在質膜接觸處發生質膜成份的一系列變化,主要是某些化學鍵的斷裂與重排,zui后打通兩質膜,形成雙核或多核細胞(此時稱同核體或異核體)。通過有絲分裂,細胞核便發生融合,形成雜種細胞。
         
        實驗用品
        1. 器具 顯微鏡 離心機 天平 離心管 注射器 細滴管 載片、蓋片
        2. 試劑 50%聚乙二醇(PEG):稱取一定量的PEG(MW=4000)放入刻度試管,在酒精燈火或沸水中加熱溶化。待冷至50℃時,加入等體積并預熱至50℃的GKN 液混勻。
        Alsver 液:葡萄糖2.05g 檸檬酸鈉0.8g NaCl 0.42g,加重蒸水至100ml。
        GKN 液:NaCl 8g,KCl 0.4g,Na2HPO4·2H2O 1.77g,NaH2PO·2H2O 0.69g,葡萄糖2g,酚紅0.01g,溶于1000ml 重蒸水中。
        0.85%NaCl 液
        3. 材料 一齡公雞靜脈血
         
        實驗內容及方法
        1. 用注射器取2ml Alsver 液,再從翼下靜脈取雞血2ml,注入試管內,再加6ml Alsver 液,混勻后置4℃冰箱中可備作3—4 天用。
        2. 實驗時取“1"液1ml 于離心管中,加入4ml 0.85%的NaCl 液,混勻平衡后以1200r/min離心5 分鐘。
        3. 去上清液。再重復“2"兩次,zui后一次離心10 分鐘。
        4. 在沉降血球中加入1mlGKN 液,混勻使之成為細胞懸液。(可加GKN 液調節稀釋使每立方毫米含紅細胞3~4 萬個)。
        5. 在“4"液中加入6—8 滴(約0.5ml)50%的PEG 液,迅速混勻,常溫下2~3min 滴片鏡檢。觀察時注意不同程度的融合現象。通常分為五個階段。①兩細胞膜接觸,粘連;②細胞膜形成穿孔;③兩細胞的細胞質連通;④通道擴大,兩細胞連成一體;⑤細胞*合并,形成一個含有兩個或多個核的圓形細胞。
        6. 計算融合率。

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