細(xì)胞培養(yǎng)是將器官、組織或細(xì)胞從生物機(jī)體中取出，模擬該器官、組織或細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)的生理?xiàng)l件，在體外進(jìn)行培養(yǎng)，使其能夠繼續(xù)生存、生長和繁殖。一些研究結(jié)果表明，許多種類的動物或植物的細(xì)胞都能在人工培養(yǎng)條件下生存、生長和繁殖。
現(xiàn)代的動物細(xì)胞培養(yǎng)始于美國動物學(xué)R.G.Harrison。他于1906年在無菌條件下，以淋巴液做培養(yǎng)基，培養(yǎng)了蝌蚪的神經(jīng)板，并觀察到神經(jīng)細(xì)胞突起生長的過程。到了20世紀(jì)后半葉，隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的崛起，為了在活細(xì)胞中研究生命現(xiàn)象，細(xì)胞培養(yǎng)方法得到了廣泛的發(fā)展和應(yīng)用。
細(xì)胞培養(yǎng)的突出優(yōu)點(diǎn)，一是便于研究各種物理、化學(xué)等外界因素對細(xì)胞生長、發(fā)育和分化等的影響。因?yàn)槿斯づ囵B(yǎng)條件易于改變，并能得到嚴(yán)格的控制，有利于單因子分析。二是細(xì)胞培養(yǎng)便于我們對細(xì)胞生長、發(fā)育過程的觀察，可以用顯微鏡直接觀察亦可應(yīng)用顯微縮時電影技術(shù)記錄其進(jìn)程。因而，細(xì)胞培養(yǎng)是探索和解釋細(xì)胞生命活動規(guī)律的一種簡而易行的技術(shù)。
然而，細(xì)胞培養(yǎng)方法也有其局限性，由于培養(yǎng)的細(xì)胞生活在脫離了機(jī)體的復(fù)雜的環(huán)境條件下，其生態(tài)環(huán)境和細(xì)胞之間的相互關(guān)系都改變了，因此，其細(xì)胞生物學(xué)性質(zhì)必然也會發(fā)生某些改變。所以在人工培養(yǎng)條件下觀察到的結(jié)果難于正確反映細(xì)胞或組織在機(jī)體內(nèi)部的狀況。這一點(diǎn)是我們在應(yīng)用此技術(shù)進(jìn)行研究時應(yīng)該注意的。
盡管如此，由于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是其他實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)所不能比擬的，所以近年來，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、老年學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)和病毒學(xué)等很多領(lǐng)域都得到了廣泛的應(yīng)用，并取得了很多重大的成果。
細(xì)胞培養(yǎng)是一種程序復(fù)雜而又要求十分嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)技術(shù)。要使細(xì)胞在體外生存，必須模擬體內(nèi)環(huán)境，共給細(xì)胞存活所必需的條件。如供給適量的水、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖以及有關(guān)的生長因子；氧氣及適宜的溫度；注意調(diào)節(jié)其外環(huán)境的酸堿度（pH）與滲透壓；以及為排除細(xì)胞代謝產(chǎn)物的危害，保持良好適宜的外環(huán)境而進(jìn)行必需的傳代等等。所有這一切條件與操作都要保持在無菌條件下進(jìn)行。
一、目的與要求
通過本實(shí)驗(yàn)了解原代細(xì)胞與傳代細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法以及在細(xì)胞培養(yǎng)過程中嚴(yán)格的操作程序。
初步掌握無菌操作的基本原則，認(rèn)識無菌操作在細(xì)胞培養(yǎng)中的重要性。
二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、原代細(xì)胞的制作——示范
2、傳代細(xì)胞的傳代
三、實(shí)驗(yàn)步驟
（一）原代細(xì)胞的制作——以乳鼠腎細(xì)胞原代單層靜置培養(yǎng)為例，按實(shí)驗(yàn)時操作的順序進(jìn)行描述。
1.操作者首行手的清洗與消毒，再將實(shí)驗(yàn)用品放在合適的位置，然后配置營養(yǎng)液及調(diào)節(jié)平衡鹽液的pH值。
