染色體制備體會

時間：2016/11/21閱讀：1025

1、培養基PH濃度、小牛血清量及培養箱溫度的恒定是培養成功關鍵；
2、秋水仙素適量、適宜的處理時機和時間，是獲得良好、足夠分裂相的條件。分裂相的多少和染色體形態及帶型處理良好與否均受其影響。
3、低滲處理是獲得分散良好的分裂相關鍵步驟，低滲過度或不足都會造成染色體形態不良的結果。在低滲處理時期細胞十分嬌嫩，并且表面發粘，低滲細胞混勻時，吹打要適宜，避免細胞破碎及粘團，另外不要將細胞吸到吸管上部及離心管上部，避免細胞丟失。
4、固定技術是制備良好分散的染色體的重要步驟。若染色體分數不良，可適當加大冰乙酸含量，其同時有改善由于低滲處理不夠或固定不充分所造成的缺陷，但過量會造成染色體形態變化和影響分帶結局。染色體形態不良與固定液速度有關，加第1次固定液過快或打過快，可造成飄帶樣染色體； 5、固定液每次使用必須新鮮配制，否則將會形成酯類，從而影響固定效果。6、滴片是染色體制備中影響染色體形態的關鍵一步。首先要載玻片要非常干凈，否則會影響染色體的分散和分帶效果。其次是滴片的距離、滴加量多少、制片的方式都會影響染色體分期效果。 7、烤片：是染色體制備中zui后一步技術。烤片的溫度、時間與染色體形態和分帶有關。不宜溫度過高和烤片時間過長。
十四、染色體實驗技術分析
染色體分裂指數低：患者處于非常時期（感染期、放、期）：
培養基營養成份不良；
培養基PH偏低或偏高；
PHA過量或不足；
小牛血清質量不高；
小牛血清數量偏低或過高；
培養溫度不穩定；
培養箱溫度偏低；
秋水仙素處理時間過短；
離心時間或速度不足；
制備過程損失過大。
染色體形態不理想：受檢者處于非常時期；
PHA過量；
小牛血清質量不高；
培養箱溫度不恒溫；
秋水仙素量不當；
低滲時間不理想；
低滲溫度過高；
離心速度過高；
固定液加速過快；
固定混勻手法過重；
吹片技術不良。

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