士鋒生物重組質粒的構建設計

時間：2015/11/17閱讀：774

基因工程又稱遺傳工程、DNA 重組技術、分子克隆等。它是七十年代在分子生物學發展的基礎上形成的新學科。所謂基因工程，就是在分子水平上，用人工方法提取（或合成）某一生物的遺傳物質，在體外切割，拼接和重新組合，然后通過載體把重組的DNA 分子引入受體細胞，使外源DNA 在受體細胞中進行復制和表達。按人們的意愿定向創造生物新性狀，使之穩定地遺傳給下一代。所以基因工程具有廣闊的應用前景，即能為工農業生產和工醫藥保健等開拓新途徑，又能為生物的細胞分化，生長發育，腫瘤發生等基礎研究提供有效的實驗手段。
近十余年來，基因工程的發展和應用，迅速地推動了生物科學的發展，目前，基因工程技術已成為生物學領域許多實驗室的常用技術，它的性和普及性使人們感到有必要在大學的教學課程中得到反映。所以，我系已為十幾屆本科生、研究生開設了基因工程技術實驗，選擇一些zui基本，zui常用的技術，以使同學對基因工程有一個基本的了解，并能掌握一些基本技術。
但是基因工程的實際技術和實驗系統正在不斷的創新，新方法、新技術不斷推出，而且在有限的學時內，所能觸及的技術只是基因工程中極少的一部分，但從教學角度來看，是不可能面面俱到。我們只是希望通過本實驗，讓同學通過基因工程中zui基本的技術訓練，為今后獨立工作打下基礎。
本實驗設計主要參考書為T·Maniatis 的《Molecuiar clong》第三版，彭秀玲等編著的《基因工程實驗技術》等。實驗中所選擇的方法和條件以適合于本實驗室設備為，具體參考應用時，可作適當更改。
本套實驗設計過程如下：
1. 染色體DNA的抽提
2. PCR 擴增分離目的DNA 片段
3. 載體貭粒的抽提、純化及檢測
4. 載體及目的DNA 片段的限制性核酸內切酶酶切與連接
5. 重組貭粒轉化大腸桿菌
6．重組子的篩選、重組質粒的抽提與鑒定

士鋒生物重組質粒的構建設計

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