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        上海士鋒生物科技有限公司
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        標準品
        培養基
        培養基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標準血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養基 即用型液體培養基 一次性培養基平板 顯色培養基 臨床培養基 菌種保存培養基 四環素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養基 維生素檢測培養基 一次性衛生用品衛生檢測培養基 罐頭食品商業無菌檢測培養基 飲用水及水源檢測培養基 藥品、生物制品檢測培養基 化妝品檢測培養基 動物細胞培養基 啤酒檢驗培養基 軍團菌檢測培養基 支原體檢測培養基 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗培養基 彎曲桿菌檢驗培養基 產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養基 阪崎腸桿菌檢驗培養基 溶血性鏈球菌檢測培養基 李斯特氏菌檢測培養基 弧菌檢測培養基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養基 酵母、霉菌檢測培養基 檢測培養基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養基 細菌總數檢測,增菌培養基
        抗體
        生物試劑
        細胞
        菌株
        血清
        細胞分離試劑
        試劑盒

        動物淋巴管內皮細胞的分離

        時間:2015/1/29閱讀:805
        分享:
          實驗材料:
          
          1.哺乳動物胸導管淋巴管
          
          2.1×PBS,含100u/ml和100μg/ml,pH7.4
          
          3.0.2%Ⅰ型膠原酶
          
          4.眼科剪,
          
          5.慕絲線(7號線)、細鐵絲
          
          6.離心管(15ml、50ml)
          
          實驗方法:
          
          1.處死動物后,打開胸腔,分離胸導管,在胸導管上端結扎,切取10-15cm的一段。將胸導管放入預冷PBS中漂洗。
          
          2.在解剖顯微鏡下,用眼科剪和剝除外膜的脂肪和纖維組織,然后用PBS反復沖洗管腔。
          
          3.將胸導管移入含PBS的大培養皿中,清洗3次。在胸導管的遠端插入靜脈留置針,并結扎固定。用PBS沖洗管腔后,將游離端結扎。用靜脈留置針向管腔內注入消化液,至淋巴管充盈為止。在37℃條件下,消化10min。淋巴管的管壁較薄,灌注消化時間不宜過長,以免消化過度,引起成纖維細胞的污染。
          
          4.取出胸導管,在游離端剪一小口,用離心管收集消化液,然后用培養液沖洗管腔,收集消化液和沖洗液,以1000r/min,離心10min。離心后吸去上清液,用培養液輕輕混懸細胞。
          
          5.將細胞接種于培養皿或培養板中,培養24h后補充培養液,繼續培養。每隔2-3d換液1次。換液時,吸去1/2-2/3培養液,再加入新鮮培養液。
          
          6.原代培養4-6h后,大部分細胞已貼壁生長。24h后,內皮細胞形成由數個細胞組成的細胞群。淋巴管內皮細胞的活性較低,原代培養時細胞生長緩慢。2-3周后,細胞生長形成單層。淋巴管內皮單層呈卵石狀特征性排列,可傳代培養。
          
          7.PriCells-原代內皮細胞特制基礎培養基
          
          8.PriCells-原代內皮細胞培養特制添加劑
          
          9.PriCells-原代細胞分離試劑盒
          
          10.PriCells-原代細胞鑒定試劑盒

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