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        上海士鋒生物科技有限公司
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        標準品
        培養基
        培養基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標準血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養基 即用型液體培養基 一次性培養基平板 顯色培養基 臨床培養基 菌種保存培養基 四環素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養基 維生素檢測培養基 一次性衛生用品衛生檢測培養基 罐頭食品商業無菌檢測培養基 飲用水及水源檢測培養基 藥品、生物制品檢測培養基 化妝品檢測培養基 動物細胞培養基 啤酒檢驗培養基 軍團菌檢測培養基 支原體檢測培養基 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗培養基 彎曲桿菌檢驗培養基 產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養基 阪崎腸桿菌檢驗培養基 溶血性鏈球菌檢測培養基 李斯特氏菌檢測培養基 弧菌檢測培養基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養基 酵母、霉菌檢測培養基 檢測培養基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養基 細菌總數檢測,增菌培養基
        抗體
        生物試劑
        細胞
        菌株
        血清
        細胞分離試劑
        試劑盒

        原代培養人前脂肪細胞的培養

        時間:2014/11/10閱讀:770
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        材料與試劑:  
        鑷子、剪子、培養皿  
        離心管、培養瓶、吸管、滴管  
        200目篩網  
        膠原酶(10ml)(20mg膠原酶、200mg牛血清白蛋白、10毫升雙蒸水)國外也用培養基配.  
        方法:  
        1、取無菌條件下新鮮切除的人腹部皮下脂肪組織約5-10克,放入培養皿,用1×PBS沖洗2-3次,充分洗去血污,剔除結締組織和可見血管。  
        2、充分剪碎脂肪組織為1mm×1mm的小塊。  
        3、將其加入到含有5毫升膠原酶的離心管里,37度水浴振蕩消化1小時。  
        4、將含有組織的消化液加入到有10毫升DMEM/F12培養基的離心管中,并且使用吸管反復吹打使組織塊分散,然后通過孔徑25μM(200目)的篩網過濾,收集濾液和未過濾的組織塊。  
        5、將濾液以600g離心5分鐘棄上清,加入原代培養的基礎培養基制成細胞懸液。  
        6、將未濾過的組織按照上述過程再處理一次,將倆次獲得的細胞懸液混勻計數,按照104個/cm2的密度接種于培養瓶里,于37度,5%CO2培養箱中培養。  
        接種12-16小時基本貼壁。在增殖狀態下的前脂肪細胞可以使用消化的方法傳代,并且可以凍存和復蘇。 

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