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        上海士鋒生物科技有限公司
        中級(jí)會(huì)員 | 第14年

        13127537090

        標(biāo)準(zhǔn)品
        培養(yǎng)基
        培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
        抗體
        生物試劑
        細(xì)胞
        菌株
        血清
        細(xì)胞分離試劑
        試劑盒

        豬肺泡巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)

        時(shí)間:2014/11/3閱讀:810
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        1、細(xì)胞培養(yǎng)所用溶液及其配制

        1×RPMI1640及:按照產(chǎn)品說明配制,過濾除菌,4℃保存?zhèn)溆谩?/em>

        新生牛血清:56℃滅活30min,-20℃保存?zhèn)溆谩?/em>

        2×104U/ml青、液(雙抗):青各2×106 U溶于100ml滅菌雙蒸水中,過濾除菌,分裝,-20℃保存?zhèn)溆谩?/em>

        10×Na2EDTA-溶液(2.5%):Na2EDTA 0.2g,NaCl 8.0g,KCl 0.2g ,Na2HPO4.12H2O 2.89g,KH2PO4 0.2g,1%酚紅溶液1.5ml,(1:250)2.5g,溶于100ml雙蒸水中,NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2~7.5,過濾除菌,分裝,-20℃保存?zhèn)溆茫褂脮r(shí)1∶10倍稀釋。

        7.5%NaHCO3: 7.5g NaHCO3溶于100ml雙蒸水中,115℃高壓滅菌15min,置4℃冰箱冷藏備用。

        10% RPMI1640營(yíng)養(yǎng)液:于1×RPMI1640溶液中加入10%小牛血清,按照1% 比例加入2×104U/ml雙抗,用7.5% NaHCO3或10% HCl溶液調(diào)節(jié)pH值至7.2~7.4。

        2、將50日齡的SPF仔豬放血,結(jié)扎氣管后無(wú)菌摘取其肺臟,先用0.9%的生理鹽水洗滌外表面,將pH7.2的PBS30.0ml從氣管灌入肺臟,輕輕拍打肺表面,1~2min后回收灌洗液,如此反復(fù)進(jìn)行,直至灌洗液清亮為止。將回收的支氣管肺泡灌洗液用吸管輕輕吹打,將細(xì)胞團(tuán)塊打散,用單層無(wú)菌100目不銹鋼篩過濾,收集全部灌洗液,2000r/min離心10min,收集沉淀。洗滌兩次后加入適量含10%胎牛血清的1×RPMI1640營(yíng)養(yǎng)液吹散細(xì)胞,置培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中于37?C CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),待其貼壁后棄去上清及非黏附細(xì)胞繼續(xù)用含10%胎牛血清的1×RPMI1640培養(yǎng)液培養(yǎng)備用。

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