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        上海士鋒生物科技有限公司
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        標準品
        培養基
        培養基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標準血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養基 即用型液體培養基 一次性培養基平板 顯色培養基 臨床培養基 菌種保存培養基 四環素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養基 維生素檢測培養基 一次性衛生用品衛生檢測培養基 罐頭食品商業無菌檢測培養基 飲用水及水源檢測培養基 藥品、生物制品檢測培養基 化妝品檢測培養基 動物細胞培養基 啤酒檢驗培養基 軍團菌檢測培養基 支原體檢測培養基 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗培養基 彎曲桿菌檢驗培養基 產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養基 阪崎腸桿菌檢驗培養基 溶血性鏈球菌檢測培養基 李斯特氏菌檢測培養基 弧菌檢測培養基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養基 酵母、霉菌檢測培養基 檢測培養基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養基 細菌總數檢測,增菌培養基
        抗體
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        細胞
        菌株
        血清
        細胞分離試劑
        試劑盒

        士鋒生物染色體GTG標本制備

        時間:2014/8/27閱讀:711
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        一、原理
        非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪--曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著色首先取決于二個噻嗪分子同DNA結合,在此基礎上再結合一個曙紅分子,其次取決于一個疏水環境,以利于染料沉淀而著色。通過的顯帶預處理可除去陰性G帶區的疏水蛋白,或使它們的結構變成更疏水狀態。由此可知,在G顯帶中抽取的蛋白往往是疏水的,且主要來自陰性G帶區。
        二、用品和試劑
        0.25%(0.85%NaCl配制,pH為7.2—7.4),余同實驗一。
        三、操作步驟
        1.標本老化:
        按常規制備人外周血淋巴細胞染色體標本(未染色)氣干后,經78℃烘箱2—3小時。 取出置37℃恒溫箱3天后預處理。
        2.預處理:
        將染色體標本浸入溶液(已置4℃冰箱穩1小時以上)中40—50秒,取出立即水洗去多余。
        3.Giemsa染色:
        1∶10 Giemsa染色液染色5—10分鐘,洗去多余染料,氣干。
        4.鏡檢:油鏡下可見分散良好的染色體縱軸上呈現深淺不同帶紋,即為可讀標本。
        四、注意事項
        1.常規制備的染色體標本,要有較多分裂相,分散良好,染色體長度適中。
        2.GTG帶的關鍵在于處理的時間。若染色體仍著色較深,帶紋不明,則預處理時間不足,應延長預處理時間;若染色體變粗并顯出毛糙邊緣,甚至呈糊狀,則為預處理過度,應適當縮短處理時間。
        3.Giemsa染色時間要適中,時間短,著色不夠,深淺帶反差小;時間過長,著色深,亦影響帶紋反差,不易識別。

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