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        上海士鋒生物科技有限公司
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        標準品
        培養基
        培養基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標準血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養基 即用型液體培養基 一次性培養基平板 顯色培養基 臨床培養基 菌種保存培養基 四環素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養基 維生素檢測培養基 一次性衛生用品衛生檢測培養基 罐頭食品商業無菌檢測培養基 飲用水及水源檢測培養基 藥品、生物制品檢測培養基 化妝品檢測培養基 動物細胞培養基 啤酒檢驗培養基 軍團菌檢測培養基 支原體檢測培養基 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗培養基 彎曲桿菌檢驗培養基 產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養基 阪崎腸桿菌檢驗培養基 溶血性鏈球菌檢測培養基 李斯特氏菌檢測培養基 弧菌檢測培養基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養基 酵母、霉菌檢測培養基 檢測培養基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養基 細菌總數檢測,增菌培養基
        抗體
        生物試劑
        細胞
        菌株
        血清
        細胞分離試劑
        試劑盒

        士鋒生物結晶紫染色法測定細胞數

        時間:2014/8/21閱讀:776
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        1.在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2~3小時,讓細胞帖壁。 

        2.用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標準品,根據需要3~5倍遞次稀釋待檢樣品,每孔加0.1ml稀釋的標準品或待檢樣品,每個稀釋度3個重復孔。對照孔6個,3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養液,3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養液。繼續培養18~24小時。 

        3.甩去培養液,用PBS小心洗滌一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鐘。 

        4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml結晶紫染液,室溫中放置20分鐘。 

        5.輕輕甩去染色液,用蒸餾水洗滌各孔,將培養板倒置于吸水紙上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室溫中保存。 

        6.測定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脫色,充分振蕩后在570nm處測定光吸收度。用光吸收度(OD)值對樣品稀釋度作圖,比較標準品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性

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