士鋒生物細菌的人工培養

人工制備營養充足的培養基并提供適宜的溫度、氣體、pH等培養條件，即能使細菌在體外環境迅速生長繁殖。細菌培養對臨床上病原菌的分離鑒定、制備抗生素、制備疫苗等生物制品都是*的。 
一、培養基的制備原則： 
1、必須有充足的營養。 
2、合適的酸堿度。 
3、無菌。 
二、培養基的制備 
培養基是用人工方法將多種營養物質按照各類微生物生長的需要而合成的一種混合營養料。 
常用的培養基有基礎培養基、營養培養基、選擇培養基、鑒別培養基、厭氧培養基等。 
按照培養基的物理性狀可分為液體，固體和半固體三類。 
以下介紹常用基礎培養基的制備。 
（一）肉湯培養基： 
制法：稱取營養肉湯粉1.8g（含牛肉膏0.3克g，蛋白胨1g、氯化鈉0.5g）加入100ml蒸餾水中，用玻棒攪拌加熱溶解。按需要分裝于三角瓶或試管，瓶口或管口塞棉塞，包裝后置高壓蒸汽滅菌器內，在0.11Mpa（1.05公斤/厘米2）壓力下，溫度達1210C，維持15～20分鐘。冷卻后貼好標簽，40C冰箱貯存備用。 
制成后的肉湯呈淺黃色，清晰透明，pH 7.1+0.2 
肉湯培養基常用于增菌培養。 
（二）肉湯瓊脂固體培養基： 
在上述肉湯培養基中加入2～3%瓊脂即成。經高壓滅菌后，趁熱將試管斜置、冷凝，即成普通瓊脂斜面培養基；或趁熱取出后，稍冷，以無菌操作傾入滅菌的空培養皿，冷凝后即為普通瓊脂平板。制作瓊脂平板時，每一空皿（9厘米直徑）需培養基15～20ml。 
普通瓊脂平板用于分離培養繁殖細菌；普通瓊脂斜面用于純培養和保存菌種。（瓊脂是從石花菜等海藻類中提取的多糖物質，當溫度達到98℃以上可溶化，45℃以下則凝固。瓊脂對細菌一般無營養作用，用做斜面、平板、高層等不同類型固體培養基的凝固劑。瓊脂通常呈酸性，加入液體培養基中可使酸堿度下降pH 0.2左右。）
（三）肉湯瓊脂半固體培養基： 
在上述肉湯培養基中加入0.3～0.5％瓊脂，加熱溶化后，分裝于小試管（10×100mm），每管約3ml，高壓滅菌后直立冷凝即成。 
半固體培養基用于檢查細菌的動力和細菌菌種的保存。 
三、常用培養基介紹 
（一）基礎培養基 
基礎培養基含有大多數細菌生長繁殖時所需要的氮源、碳源、無機鹽類、水份等zui基本的營養成份，可供大多數細菌生長，并可作為營養、鑒別及選擇培養基的基礎原料。常用的如肉湯培養基。 
（二）營養培養基 
在基礎培養基中添加一些其他的營養物質，如葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏、生長因子等，可供培養營養要求較高的細菌。例如血瓊脂平板、血清肉湯培養基等。 
（三）鑒別培養基 
利用各種細菌分解糖類和蛋白質的能力及其代謝產物的不同，在培養基中加入特定的作用底物，觀察細菌在其中生長后分解底物的作用，從而鑒別和鑒定細菌。例如，單糖發酵管就是在無糖的基礎培養基（蛋白胨水）中加入某種糖類及指示劑，因不同細菌對各種糖類發酵作用不同而鑒別之。 
（四）選擇培養基 
在培養基中加入某種化學物質，使之抑制某一類細菌生長，而有利于另一類細菌生長，從而將后者篩選出來，常用在含有雜菌的標本中分離某種致病菌，例如SS瓊脂平板。 
（五）厭氧培養基（見實驗十-厭氧性細菌，P.80） 
四、細菌的接種技術和培養方法： 
一般細菌都可用人工方法進行培養，以進一步研究它們的各種生物學特性。培養細菌時，根據研究目的和細菌生長條件的差異，需采用不同的接種技術和培養方法。 
（一）細菌的接種技術 
接種技術一般分為分離培養接種法和純種細菌接種法，正確的接種技術是獲得典型的生長良好的細菌培養物所必需的。