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        熒光素標記山羊抗人乙肝表面抗原抗體 IgG

        時間:2013-2-28閱讀:546
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        熒光素標記山羊抗人乙肝表面抗原抗體 IgG

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        取材的特殊要求及注意事項 
        *
        標本新鮮:一般在2h以內進行,超過2h,組織將有不同程度的自溶,其抗原或變性消失,或嚴重彌散。 
        *
        取材部位:除取病灶或含待檢抗原部位外,還應取病灶與正常交界處,即所取組織切片中同時應有抗原陽性和陰性區,以形成自身對照。

        *常用固定液:固定劑品種很多,但大多屬于醛類和醇類。其固定原理不同,各有優缺點。 
        -
        醛類(常用甲醛、戊二醛和多聚甲醛) 
        -
        醇類(常用乙醇) 
        -
        其它 (丙酮) 
        醛類 
        *
        甲醛福爾馬林應用zui廣 
        -
        原理:形成分子間的交聯,影響蛋白構型而使之固定。 
        -
        優點:形態結構保存好,且穿透性強,組織收縮少。 
        -
        缺點: 
        *
        甲醛放置過久可氧化為甲酸,使溶液pH降低,影響染色; 
        *
        醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙; 
        *
        分子間交聯形成的網格結構可能部分或*掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露。可造成假陰性的染色結果。 
        -
        注意事項: 
        C)
        ,為此組織塊不宜過厚。°*縮短固定時間,降低固定溫度(4 
        *
        改用中性緩沖福爾馬林,以pH7.27.4 0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液配制成10%甲醛固定液,減少固定液pH的變化。 
        *
        固定后充分水洗以減少分子間交聯。 
        *
        切片在作免疫組化染色前,先經預處理使抗原再現抗原修復

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